转基因应用PPT.pptx

转基因动物技术及应用ZCH2017-12-25ATCG?64个密码子，20种氨基酸？物质元素种类100+？118 or 11118大胆质疑，谦卑求知转基因动物技术及应用一、转基因动物二、基因导入的方法三、基因转移后的存在方式及表达四、应用研究及安全评价五、具体事例世界首只转基因灵长类动物 ——-安迪世界第一只转基因动物一、什么是转基因动物转基因动物是指用实验导入的方法将外源基因在染色体基因内稳定整合并能稳定表达的一类动物。（包括基因敲除的动物）二、转基因的导入方法显微注射法逆转录病毒感染胚胎法转基因导入方法胚胎干细胞法精子载体法细胞核移植法生殖细胞转染法显微注射法? 显微注射法是通过显微操作仪将外源基因直接注射到受精卵的原核中，该法是产生最早且又最为有效的转基因方法 。?但原核显微注射法技术难度比较大，不仅需要昂贵的仪器，而且需要一定的操作技巧。显微注射法 基因原核注入 显微图像显微注射法基本流程逆转录病毒感染胚胎法 将外源基因重组到DNA病毒或RNA病毒上，再用重组的DNA病毒或RNA病毒去感染着床前后的胚胎，随后病毒基因插入到宿主胚胎基因组中，外源基因也自然整合到胚胎基因组中。 逆转录病毒感染胚胎法是近年来兴起的基因转移方法，操作相对简单而且感染后基因的整合效率高。慢病毒表达系统：一种很常用的哺乳动物病毒表达系统；/ProductView.Asp?id=47慢病毒感染宿主细胞时，可将携带的外源基因随机、稳定地整合入宿主细胞基因组中，实现目的基因稳定、长期的表达，非常适合于/ProductView.Asp?id=49基因过表达稳定细胞株的建立和RNAi研究??腺病毒表达系统：一种很常用的哺乳动物病毒表达系统；但与慢病毒不同的是，/productView.asp?id=11腺病毒基因组及其携带的外源基因不会整合入宿主细胞的基因组中，而是游离于宿主基因组外独立表达，因此可实现目的基因瞬时、高丰度的表达，同时还避免了因整合而引发的潜在的基因突变和随机效应，安全性和可控性高。???逆转录病毒表达系统：/productView.asp?id=15逆转录病毒将自身基因组及其携带的外源基因随机、稳定地整合入宿主细胞基因组中，可实现目的基因稳定、长期的表达。/productView.asp?id=15逆转录病毒表达系统根据不同的包装细胞系可分为单嗜性、双嗜性和泛嗜性，不同包装细胞产生的逆转录病毒能够特异性地/ProductView.Asp?id=47感染某一个或某一类宿主细胞。辉骏生物采用的病毒/ProductView.Asp?id=49包装细胞系为plat E细胞系，该细胞系包含gag、pol和env基因，因此转染单一表达质粒就可以包装出逆转录病毒，但是该病毒具有很强的针对性，只适用于大鼠、小鼠/ProductView.Asp?id=49细胞稳定株的建立。胚胎干细胞法 胚胎发育卵泡阶段的细胞能在培养基中体外增殖，当把他们重新输回胚胎胚泡后，仍保留着分化成其他细胞（包括生殖细胞）的能力，这些细胞称为多效性胚胎干细胞（ES）。 ES在体外培养时可承受转基因操作而不影响其分化多效性，外源基因通过同源重组方式特异性整合在ES基因组内的一个非必需位点上，构成工程化胚胎干细胞，工程化胚胎干细胞经筛选鉴定和体外扩增，再输回小鼠胚胎胚泡中，最终形成转基因动物。 胚胎干细胞法胚胎干细胞法生产转基因动物的流程图精子载体法 精子载体法是精子和外源DNA混合培养时，外源DNA可直接进入精子的头部，通过受精将外源基因引入动物细胞中。 外源DNA导入精细胞的方法有DNA与精子共育法、点穿孔导入法、脂质体转染法。精子载体法精子载体法生产转基因的基本流程细胞核移植法　 细胞核移植技术，就是将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使后者不经过精子穿透等有性过程即无性繁殖即可被激活、分裂并发育成新个体，使得核供体的基因得到完全复制。以供体核的来源不同可分为胚细胞核移植与体细胞核移植两种。细胞核移植法核移植也称克隆或无性繁殖，是将分离的胚胎卵裂球(核供体)或体细胞核与成熟并去核的卵母细胞或去核的原核期受精卵的去核胚胎(核受体)融合，不经过有性繁殖过程，连续不断地复制遗传上相同的胚胎，并通过克隆胚胎的移植生产大量同基因型的克隆动物系或动物群的一项动物繁殖新技术。国产的克隆狗终于出现了，以后你会克隆一个自己死去的狗狗纪念他吗？生殖细胞转染法转基因动物的技术路线经典的技术路线? 目的基因 显微注射?已交配的 取出 移植 受体动物 妊娠供体动物 受精卵 输卵管 转基因动物 缺点：注入目的基因的命中率低，目的基因的整合率低，受精卵移植的受孕率低。?整合胚胎移植的技术路线 转基因动物 受体动物子宫 目