血型和交叉配血PPT.ppt

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血型和交叉配血;; ABO血型和RH血型是红细胞的2大血型抗原抗体系统,在输血和血液遗传学研究有重大的意义。;一、ABO血型系统;(一) ABO血型系统抗原 1. ABO血型系统的组成和遗传 是存在于RBC膜上的一种糖蛋白,有多肽和糖链组成。A和B基因是显性基因,O基因是隐性基因,由A,B基因调控。 2. ABO血型系统抗原的分布 A、B、H抗原存在于RBC膜上,也分布于WBC,PLT及其他组织细胞上。 ; 血型物质:组织细胞合成并分泌的水溶性A,B,H血型抗原多为半抗原,主要存在于体液和分泌物中,以唾液中最为丰富。 分为分泌型和非分泌型。 血型物质具有和相应的抗体反应的性质可以协助鉴定ABO血型和预测胎儿的血型。;(二) ABO血型系统抗体 分为天然抗体和免疫性抗体。 天然抗体主要为IGM型抗体。 免疫性抗体主要为IGG型抗体。;;(三)ABO血型系统亚型 A抗原主要亚型:A1和A2,中国以A1亚型为主。B亚型较少见,抗原性较弱。 ;;二、ABO血型鉴定 ; 正向定型:用已知的特异性血清检查红细胞的未知血型抗原。 反向定型:用已知的标准红细胞检查标本中未知血型抗体。 方法: 盐水凝集法:检测IGM型抗体。 2. 凝胶微柱法;;方法学评价: 1.盐水凝集法 分为玻片法和试管法。简单易行。 2.凝胶微柱法 重复性好,特异性灵敏性高,全自动分析仪可以减少人为误差。缺点:成本高,需要特殊设备。;质量保证: 1.标准血清 : 在有效期内使用,效价高,凝集力强,严防污染。常用的有: A 、人血清ABO血型抗体:特异性高,凝集效价:抗A不低于1︰128,抗B不低于1︰64,亲和力在15秒出现凝集,3分钟明显凝集,稳定性高,灭活补体。 B、人ABO单克隆抗体:特异性,亲和力,凝集效价,稳定性高。; 2. 被检红细胞: A 、标本新鲜,严防污染。 B 、特殊病人标本,加做对照及正反定型,以及用洗涤红细胞做血型鉴定。 3. 实验器材 : 清洁干糙,应正反定型,时间温度离心时间均应该严格控制。 观察结果仔细,注意出现弱凝集现象,必要时在显微镜下观察结果。 4. 综合分析实验结果。核实无误时方可以发出检查结果。;临床意义: 1.输血 2. 器官移植 3. 新生儿溶血病 4. 其他;三、Rh血型系统 ;(一) Rh血型系统的命名 1 . Fisher-Race 命名法(CDE命名法) A、遗传基因位于1号染色体短臂上的连锁基因,每条有三个基因位点,依次排为CDE。 B、各基因位点由一对等位基因组成。C CDE以复合体的形式遗传 D 可有8种基因组合和36种遗传型。;2. ISBT命名法。 3. Rh血型系统表型及基因型。根据红细胞上有无D抗原为Rh阳性和 Rh阴性。 ;(二) Rh血型系统抗原及抗体 1. Rh血型系统抗原 仅次于ABO血型系统的A、B抗原。与人类密切的是D、E、C、c、e。 2. Rh血型系统抗体 天然抗体极少,由输血或妊娠刺激产生的IGG型免疫性抗体。以抗D最为常见。;(三)Rh血型鉴定 常用方法有酶介质法,低离子强度溶液试验,抗人球蛋白试验,凝集胺试验及人源盐水介质抗D试验。 检测原理 1.酶介质法 :用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面的唾液酸,降低红细胞表面的负电荷,减少排斥力,促进Rh抗原与抗体的结合而产生红细胞凝集。;2.聚凝胺试验:聚凝胺是带高价阳离子的季胺盐,有利于红细胞凝集。由Rh抗体致敏的红细胞产生凝集是特异性的不可逆凝集,非抗体致敏的凝集为可逆性凝集。 3. 抗球蛋白试验 (Coombs Test):是检测红细胞上不完全抗体的经典方法。利用抗球蛋白抗体作为第二抗体,通过连接致敏红细胞表面的特异性Rh抗体,出现特异性凝集。 ;4.人源盐水介质抗D试验:利用免疫球蛋白变性剂处理,使IGG变为IGM类抗体,能在盐水介质中发生凝集现象,用于快速鉴定。 5.低离子强度溶液试验 ;方法学评价 ;质量保证 1.检测前:标本新鲜,严防污染,被检红细胞用生理盐水洗涤。 试剂器材要在有效期内的合格试剂,器材清洁干燥。 ;2.检测中: A 、严格遵守操作规程 。 B 、严格控制抗原抗体比例、介质浓度、反应时间温度以及离心条件等关键因素。 C、每次均需阴性阳性和试剂对照。 D、观察结果不可用力震摇,结果可疑用显微镜观察确认。 3. 检测后:复查实验全过程,填写报告并于4度保存标本一周以上。 ;临床意义 1. Rh血型鉴定及交叉配血 2

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