RNA的生物合成PPT.ppt

第 十 一 章;转录 (transcription)：以DNA为模板指导合 成RNA的过程。是RNA合成的主要方式。 RNA复制(RNA replication):以RNA为模板指 导合成RNA的过程。主要见于除逆转录病 毒以外的RNA病毒。;转录 (transcription) 生物体以DNA为模板指导合成RNA的过程。 ;;参与转录的物质;模板链(template strand) 按照碱基配对原则指导转录生成RNA的DNA单链。又称有意义链、Watson链。 编码链（coding strand) 模板链的互补链。又称反意义链、Crick链。其碱基序列与mRNA一致，若以U代替T。文献中刊出的基因序列为编码链。;5′···GCAGTACATGTC ···3′;σ亚基（因子）;核心酶 (core enzyme);σ亚基：功能是辨认转录起始点。 α2ββ`称核心酶(core enzyme)：催化NTP按模板的指引合成RNA。转录延长阶段仅需核心酶。 全酶(holoenzyme)：转录起始时需全酶。;; 结构基因 （编码序列）;原核生物启动子（RNA聚合酶保护区）;开始转录;原核生???启动子结构;转录过程 ;1.σ因子辨认转录起始点,全酶与之结合。σ因子辨认结合启动子－35区的TTGACA序列。 2.全酶随即移向－10区的TATAAT序列并跨入转录起始区。;3.解开局部双链，在RNA-pol催化下，生成RNA第一个3`,5`磷酸二酯键，形成转录起始复合物。 RNApol(α2ββ`σ)-DNA-pppGpN-OH3` 转录生成的RNA的第一位，即 5`端总是GTP或ATP，以GTP更为常见。 4.σ因子即从转录复合物上脱落，转录起始结束。;(NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi;2.酶是沿着模板链的3`→5`方向，转录产物是从5`→3`延长。 3.转录空泡(transcription bubble)亦称转录复合物，包括：核心酶、DNA模板和转录产物。 4.在DNA模板上多个转录同时进行，转录的mRNA上多聚核糖体翻译。;转录空泡(transcription bubble)：;;三、 转录终止;作用机制： RNA转录接近终点时，3`末端出现polyC ，ρ因子与polyC结合，ρ因子和RNA聚合酶发生构象变化，RNA聚合酶停顿。 ρ因子ATP酶活性和解螺旋酶的活性使DNA:RNA杂化双链拆离，RNA从转录复合物中释放。;A T P;2、非依赖ρ因子的转录终止;5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` ;机理：茎环结构在RNA末端形成，改变RNA聚合酶的构象，使转录停顿。通过茎环结构与RNA聚合酶及DNA的相互作用，使RNA解离出来，转录终止。;茎环结构使转录终止的机理;一、真核生物的RNA聚合酶;真核生物RNA聚合酶特性与催化产物;hnRNA(杂化核RNA，hetero-nuclear RNA)：经加工生成mRNA snRNA(核内小RNA, small nuclear RNA) ：有多种，由100-300核苷酸组成，参与RNA的剪接过程。;;转录起始点;（一）顺式作用元件（Cis-acting element）;5’;启动子保守序列可结合不同的转录因子，参与转录起始。 TATA盒常是启动子的核心序列，可结合TBP(TATA bonding protein，TATA结合蛋白)。 转录起始时，多种转录因子结合于启动子，真核RNA-pol通过转录因子间接与启动子结合，与原核RNA-pol不同。;增强子(enhancer)：是远离转录起始点，具有增强启动子转录活性的DNA序列。其可与增强子结合蛋白EBP(enhance binding protein)结合，促进转录。 沉默子(silencer)：是远离转录起始点，可抑制基因转录的DNA序列。其可与转录抑制因子（transcription inhibitor）结合，抑制转录。;（二）转录因子(transcriptional factor);（二）转录因子(transcriptional factor); TFIID由两类亚基组成 TBP(TATA binding protein，TATA结合蛋白) TAF(TBP associated factors，TBP辅助因子);参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ ;(三)转录起始前复合物;polⅡ;（四）转录起始复合物;polⅡ; 三、转录延长;RNA-Pol;四、转录终止;5?------AAUAAA-; 原核生物转录生成的RNA一般不