第8章节 病原学诊断与防治.ppt

第八章 病原学诊断与防治 第一节 细菌学诊断 包括； 细菌学诊断——检测病原菌及其抗原，产物或核酸 血清学诊断——检测患者血清中特异性抗体 一、病原菌检测 根据不同疾病以及疾病不同时期，采取不同标本。 标本采集时应注意无菌操作，尽量避免杂菌污染。 应在使用抗菌药物前采集标本，否则注明药物种类。 标本必须新鲜，采集后尽快送检，或冷藏送检。 标本做好标记，详细填写化验单，保证各环节的准确无误。 二 血清学诊断 用已知的细菌或其特异性抗原检测患者血清或其它体液中特异抗体和其效价的动态变化，可作为某些感染性疾病的辅助诊断。一般采取病人的血清进行试验，故称为血清学诊断(serological diagnosis)。 血清学诊断最好取患者急性期和恢复期双份血清标本，当后者的抗体效价比前者升高大于等于4倍时方有意义。 第二节 病毒学诊断 二 病毒的分离与鉴定（virus isolation and determination） （一）病毒的分离 动物接种：选择易感动物及接种部位，观察发病情况。 鸡胚培养：不同病毒选择不同接种部位，羊膜腔，分离流感病毒最常用。 细胞培养：分离病毒最常用的方法 （1）原代细胞：来源于动物、鸡胚、人胚组织细胞，对多种病毒敏感，但只能传2-3代。 （2）二倍体细胞：在体外分裂50-100代后仍保持2倍体染色体数目的单层细胞，用于疫苗生产。 （3）传代细胞：能在体外持续传代的细胞，多由癌细胞或二倍体细胞突变而来。 病毒在培养细胞中增殖的指标 细胞的变化 （1）出现细胞病变效应（cytopathic effect, CPE）：即某些病毒在细胞内增殖引起的特有的细胞病变（细胞变圆、聚集、坏死、溶解、脱落等） 病毒在培养细胞中增殖的指标 细胞的变化 （1）出现细胞病变效应 （2）形成细胞融合（多核巨细胞） 细胞的变化 （1）出现细胞病变效应 （2）形成细胞融合（多核巨细胞） （3）包涵体 Hemadsorption: attachment of erythrocytes to surface of virus-infected cells, due to the presence of virus-encoded hemagglutinin(influenza, parainfluenza, mumps, togaviruses) in the cellular membranes. （二）病毒的数量与感染性测定(嗜斑法） 三、病毒感染的血清学诊断 用已知病毒抗原检测病人血清中相应抗体，以诊断病毒性疾病（中和实验、补体结合实验、血凝抑制实验、凝胶免疫扩散等） 双份血清 四、 病毒感染的快速诊断 (一)?? 形态学 电镜：直接观察病毒 光镜：包涵体 （三） 检测病毒特异性IgM抗体 检测病毒特异性IgM抗体可诊断急性感染， 如风疹病毒。 （四） 检测病毒核酸 1 核酸杂交 ?? 斑点杂交（dot hybridization） ?? 原位杂交（in situ hybridization） ?? DNA印迹杂交（Southern blot） ?? RNA印迹杂交 （Northern blot） 2 核酸扩增 聚合酶链反应 （polymerase chain reaction，PCR )） 反转录PCR（Reverse transcription PCR，RT—PCR) 3 基因芯片技术（gene chip） 第三节 真菌学诊断 第四节 特异性预防与治疗 死疫苗 活疫苗 二、 人工被动免疫 抗毒素 抗菌血清 丙种球蛋白 两种人工免疫的比较 Future vaccines Synthetic peptides that correspond to antigenic determinants on a viral protein. Edible vaccines. transgenic plants synthesizing antigens from pathogenic viruses. 三、细菌感染的治疗 抗菌药物种类（人工或天然合成化学制剂） 主要作用机制: 影响细胞壁合成 影响细胞膜功能 影响细菌蛋白合成 影响细菌核酸合成 四、病毒感染的治疗 抗病毒化学制剂 核苷类药物——抑制病毒基因复制 反转录酶抑制剂 蛋白酶抑制剂 其他药物（金刚烷胺） 干扰素及干扰素诱生剂治疗 五、真菌的治疗 各种癣症 —— 外用抗真菌药 深部真菌病——除去诱因，提高免疫力，用抗真菌药物 新型隐球菌墨汁染色Cryptococcus neoformans Indi