黄芩乙醇提取物通过下调NAD特异的谷氨酸脱氢酶抑制哈维氏弧菌生长.PDFVIP

ＩＳＳＮ　 １００７⁃７６２６ 中国生物化学与分子生物学报　 ｈｔｔｐ：／ ／ ｃｊｂｍｂ．ｂｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ ２０１７年８月 ＣＮ　 １１⁃３８７０／ Ｑ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ３３（８）：８１０～８１７ ＤＯＩ：１０１３８６５／ ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｂｍｂ 黄芩乙醇提取物通过下调ＮＡＤ特异的谷氨酸脱氢酶抑制 哈维氏弧菌生长 ∗＃ ＃ 谢丽玲 ，　 朱　 琳 ，　 王爱霞，　 朱炎坤，　 黎家杰，　 周　 亮，　 毕　 潇 （汕头大学理学院生物系，广东汕头　 ５１５０６３） 摘要　 哈维氏弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｈａｒｖｅｙｉ）是水产动物的常见致病菌，对人类健康和水产经济带来巨大威 胁。 抗生素的滥用使得药物残留和耐药性问题变得日益严重。 因此，迫切需要寻找新型、不易产生 耐药性和低毒的抗菌物质。 本文研究黄芩醇提物对哈维氏弧菌的抑制作用及抑菌机制。 实验结果 表明，黄芩醇提物对哈维氏弧菌的抑菌圈为１８３３ ±０５８ ｍｍ，最低抑菌浓度（ＭＩＣ）和最小杀菌浓 度（ＭＢＣ）分别为７９２ ｍｇ／ ｍＬ和１５８４ ｍｇ／ ｍＬ。 经分析型扫描电镜（ＳＥＭ）观察和细菌胞内外蛋白 质浓度测定，发现实验组菌体表面虽有细小破裂，但形态依然完整，表面光滑，菌体细胞膜仍保持相 对完整性；通过ＳＤＳ⁃ＰＡＧＥ、蛋白质质谱（ＭＡＬＤＩ⁃ＴＯＦ⁃ＴＯＦ⁃ＭＳ）和实时荧光定量ＰＣＲ分析，显示黄 芩醇提物抑制哈维氏弧菌体内ＮＡＤ特异性的谷氨酸脱氢酶（ＮＡＤ⁃ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｇｌｕｔａｍａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ， ＮＡＤ⁃ＧＤＨ）及其ｍＲＮＡ 的表达。 本研究表明，黄芩醇提物通过下调ＮＡＤ特异性的谷氨酸脱氢酶表 达而抑制哈维氏弧菌的生长，为中药应用于水产养殖提供了新的证据。 关键词　 黄芩；哈维氏弧菌；抑菌机制 中图分类号　 Ｑ９３ Ｅｔｈａｎｏｌ⁃ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍ Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ Ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ Ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｖｉｂｒｉｏ ＋ ｈａｒｖｅｙｉ ｂｙ Ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ＮＡＤ ⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｇｌｕｔａｍａｔｅ Ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ∗＃ ＃ ＸＩＥ Ｌｉ⁃Ｌｉｎｇ ，ＺＨＵ Ｌｉｎ ，ＷＡＮＧ Ａｉ⁃Ｘｉａ，ＺＨＵ Ｙａｎ⁃Ｋｕｎ，ＬＩ Ｊｉａ⁃Ｊｉｅ，ＺＨＯＵ Ｌｉａｎｇ，ＢＩ Ｘｉａｏ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｔｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓｈａｎｔｏｕ５１５０６３，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ　 Ｖｉｂｒｉｏ ｈａｒｖｅｙｉ ｉｓ ｏｎｅ ｏｆ ｃｏｍｍｏｎ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ，ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｓｅｒｉｏｕｓｌｙ ｉｍｐｅｒｉｌｌｉｎｇ ｈｕｍａｎ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ａｑｕａｔｉｃ ｉｎｄｕｓｔｒｙ． Ｂｅｃａｕｓｅ ｏｆ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ａｂｕｓｅ， ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ａｎｄ ｄｒｕｇ⁃ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｒｅ ｂｅｃｏｍｉｎｇ ｍｏｒｅ ｓｅｒｉｏｕｓ． Ｉｔ ｉｓ ｕｒｇｅｎｔ ｔｏ ｌｏｏｋ ｆｏｒ ｎｅｗ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｓ ｗｉｔｈ ｌｏｗ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｉｌｔｙ ｔｏ ｄｒｕｇ⁃ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．Ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，ｗｅｒｅｖｅａｌｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍＳｃｕｔｅｌｌａｒｉａｏｎ