文山松毛虫质型多角体病毒在sf21细胞中离体增殖试验.pdfVIP

维普资讯 第 l7卷 2期 中 国 病 毒 学 17(2l：137—141 2002年 5月 VIR0LUGICA S】NICA May 2002 文山松毛虫质型多角体病毒在Sf21细胞中离体增殖试验 马永平，孟小林 ，像进÷ (武汉太学病毒研究昕．胡北武捉 430072) AmplificationofDendrolimuspuctatuswhenshanesisCytovirus (DpCPV-W)invitroinSf21Cell MA Yongping，MENG Xiao—lin”，XU Jin—ping (Instituteof~rotogy．WuhanUniversity．Wuhan430072．Chinzt) Abstract：W ehavestudiedamphificatlonofDpCPV W invitroinSf21celllnthispaper．Theresults showedthatDpCPV W couldamplifyisvitroinSf2Icet[andform normalpotyhedra Acce~ionalTeV eombinantenhanclninmedium coutdsynergisttheinfectiverateofDpCPV—W inSf21cel1invitro． BioassayindicatedthatthetoxicityofDpCPV—W polyhedraamplifiedinSf2Icellwasasviolencea5the polyhedraamplifiedinpinecaterpillarByusingtheplaquepurfieationtechniqueinSf21cell，DpCPV— W couldbepurified nasinglevirioncloneIevd Keywords：DendrolimuspunctatuswhenshanesisCytoplasmicPolyhedrosisVirus(DpCPV—W)；Sf21 cell；invitro；Plaquetest；Enhancin 摘要：研究了文山松毛虫质型多角体病毒 (DpCPV．W)在St21细胞中的离体增殖行为．并进行丁空斑试验．结果显 示 DpCPV．W毒株能够在Sf2i细胞 中增殖．也能在 Sf2i细胞上形成空斑．井能产生形态正常的病毒多角体。在 DpCPVW 中加入基因工程增效蛋白．能显著增加病毒粒子对离I奉细胞的感染率．增幅达 145％ 生物渤l定表明．离 体增殖的病毒多角体与虫体增殖的多角体的毒力相当。因此．Sf2i细胞可 作为文山松毛虫 CPV增殖行为研究 的离体细胞系统．也可通过空斑纯化技术对文山松毛虫CPV生产防治的病毒种进行单个病毒粒子的分离纯化。 关键词：文山松毛虫CpV(DpCPVW)；Sf2i细胞；离体；空斑试验；增效蛋白 中圈分冀号：Q253 文章标识码：A 文章编号：1003．5i25f2002102013705 文 山松毛虫质型多角体病毒 (简称 DpCPV—W) 利用替代宿主增殖 DDCPv—WD 的研究 【，但对 是一株非常优 良的病毒株_6J．自分离纯化 以来，已 DpCPV-W在离体条件下增殖行为的研究还不多． 连续十几年在不同的自然环境下防治不同种的松毛 从病毒杀虫剂的生产角度考虑，利用细胞堵养进行 虫，在使用过程 中没有发现毒力丧失或减弱现象。 病毒生产，代表了昆虫病毒杀虫剂生产的发展方 向， 最近对在文山松毛虫、德昌松毛虫、马尾松毛虫三个