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电化学微分析生物芯片检测 本文主要通过原理简介、实例分析、以及未来展望三个部分对电化学微分析生物芯片检测系统有一个概念性的了解，并且通过阅读文献，详细阐述一下当今结合MEMS技术的生物芯片技术的进展以及前景。 原理简介 原理部分的介绍我们先从题目入手：“电化学微分析生物芯片检测”。首先介绍生物芯片，接下来介绍电化学微分析系统的原理以及悬臂梁结构的基本原理。 【生物芯片】 这部分的内容在MEMS课上已经有了初步的了解，这里再回顾一下。生物芯片简单的从广义来讲就是指一切采用生物技术制备或应用于生物技术的微处理器。包括用于研制生物计算机的生物芯片，将健康细胞与电子集成电路结合起来的仿生芯片，缩微化的实验室即芯片实验室以及利用生物分子相互间的特异识别作用进行生物信号处理的基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片和组织芯片等。先进的技术使得生物芯片的尺寸不断缩小，制造成本不断降低，处理能力不断提高。由于低消耗、高通量和微型化的优势，使该技术在临床、诊断、药物、毒理等研究方面具有很大的应用潜力。 例如用于DNA序列测试的DNA芯片，其应用范围广泛，包括传染病快速检验、疾病基因诊断、环境监测、食品安全、法医鉴定等，用于DNA 生物传感器芯片的检测技术包括荧光技术，石英晶体微天平，电化学发光，表面等离子共振光谱 和电化学方法等。在这些方法中，电化学方法因其操作简单、特异性好、灵敏度高、检测费用低、易于微型化、可再生，并且不受样品中脂血、溶血情况干扰等优点而引起了人们的广泛关注。 生物芯片的种类繁多，本文后面的原理介绍以及实例分析都将主要围绕基于电化学方法和微加工技术的生物传感器芯片来展开。 前文提到了生物传感器的检测技术中的电化学方法，那么究竟什么是电化学的方法，电化学检测技术是如何进行的？ 【电化学原理】 基础知识： 电化学可以宽泛的理解为两类导体形成界面上所发生的带电及电子转移变化的科学。最简单也最为我们所熟悉的就是电解水实验了，在电解水的实验中，氧和氢是分别放在阳极和阴极产生的，即这是一个双电极的体系，但是我们所做的实验，只是测定了阳极和阴极之间的电压-电流曲线，却并不能知道各个电极在怎样的电位下进行反应，为了解决这个问题，还需要放入一根电极，就是形成三电极体系。两种体系的构造对比如下图： 加入的电极称为参比电极，作为测量进行反应的电极电位的一个基准电极，被测定的电极称为研究电极，辅助电极的作用是和研究电极组成一个让电流通畅的回路。 下面介绍一下基础的电化学过程： 当一个体系只进行一个可逆的电极反应，并且建立了电化学平衡时，电极相对于液相的电位就被称作是此电化学反应的氧化还原电位，如： 在含有Fe(CN)63-和Fe(CN)64-的水溶液中放入铂电极和参比电极，会建立如下平衡： Fe(CN)63-+e-?Fe(CN)64- Fe(CN)63-离子从铂电极中夺得电子，铂电极又从Fe(CN)64-离子中夺得电子，事平衡成立，此时铂电极电位的大小由上式中得氧化还原平衡所决定，此时的电极电位就叫做氧化还原电位。 在上述体系中，氧化还原物质都存在于溶液中，铂电极只起到传递电子的载体的作用，而另外一个Ag+/Ag的氧化还原体系则是将银电极放入含有Ag+离子的水溶液中： Ag++e+?Ag 该平衡是建立在有Ag+离子浓度所决定的某电位之下，这种平衡状态下的电极电位也叫做氧化还原电位。 在以上这种电化学平衡体系中具有一定的能量平衡关系，这种关系可以用能斯特（Nernst）方程来表述。 Ox+ne-?Red E=E0+RTnFln?(aOaR) 有了以上电化学的基础知识，让我们再次回到DNA生物传感器芯片的电化学检测过程中：DNA 探针固定到电极表面，在适当的温度、pH 和离子强度条件下，已知序列的DNA 探针与溶液中的目的DNA 序列发生杂交，从而导致电极表面结构的变化，变化的情况可通过电化学杂交指示剂所引起电信号（如电压、电流或电导）的变化体现出来，可用循环伏安法、溶出伏安法、差分脉冲伏安法、交流阻抗等方法对电信号进行检测，进而对目的基因进行定性或定量分析，如下图： 接下来笔者将详细介绍一下如何进行电化学测定。 电化学测定方法： 电化学测定方法就是指将化学物质的变化归结为电化学反应，以体系中额电位、电流、电量、阻抗、组成、时间等作为体系中发生的化学反应的量度进行的测定方法。其特点是测定简单、灵敏度高、具有即时性以及经济性。 一般来说常见的测定方法包括：伏安法，即测定平衡和反应速度；电位滴定，测定电位与化学反应；计时电位分析，观测化学反应过程；库伦分析，测定电量与化学反应；电导分析，测定本体溶液的信息；阻抗测定，提供界面的情报；化学传感，测定装置化；极谱分析，可作微量测定等。 本文将主要阐述伏安法进行电化学测定的原理，伏安法测定主要是测量电流-电