Duchenne 肌营养不良症PPT.pptVIP

Duchenne 肌营养不良症的基因诊断; 进行性肌营养不良症是一组原发于肌肉组织的遗传性疾病，其主要临床特点是进行性肌肉的萎缩与无力。 假肥大型肌营养不良症 肢带型肌营养不良症 面-肩肱型肌营养不良症 远端型肌营养不良症 眼肌型肌营养不良症 眼咽型肌营养不良症 先天性肌营养不良症 ; Duchenne 肌营养不良症（ Duchenne muscular dystrophy, DMD）是最常见的神经肌肉疾病之一，主要累及男性个体，呈 X连锁的隐性遗传，其发生率为1/3500。 ;一、临床表现; 肢带肌群并非普遍均匀地受到影响，而是某些肌肉的无力和萎缩较其它肌肉发生行为早并且更加严重。 走路缓慢，易跌倒。 登楼爬台阶困难。 走路呈典型鸭步。 仰卧位起立时呈Gower征。 游离肩与翼状肩胛。 ;二、遗传学;三、发病机理;四、实验室检查;3、肌肉活检 早期可发见大圆形透明变性和肌纤维坏死 中期则有坏死与再生纤维减少乃至消失 后期限则肌纤维几乎消失，代之脂肪和纤维减少结缔组织。 ;4、心脏检查 多有不同程度的心脏损害，表现在心电图的右心前导联的高R波和左心前导联的深Q波、心律失常及束支传导阻滞等。 5、肌肉CT和MRI检查 受累的肌肉CT检查可发现密度减低区，MRI检查可发现程度不等的“蚕蚀现象”。;五、基因诊断;（2）RFLP的连锁分析 在人类基因组中，平均约200bp可发生一次变异（称中性突变），中性突变造成了序列上的多态性，不少序列多态性发生在限制酶识别位点上，产生了限制酶酶切位点的多态性。用该限制酶水解DNA就会产生长度不同的片段，称为限制酶片段长度多态性（RFLP）。 约30%~40%的患者不能检测到明显的基因缺失或重排。这时可利用RFLP的连锁分析来进行产前诊断或检出到致病基因携带者。 ;2、PCR方法的应用;; PCR扩增一个模板要求一对寡核苷酸引物、4种脱氧核糖核苷酸（dNTP）、摩尔数超过dNTP的镁离子和进行DNA合成的热稳定DNA聚合酶。;;;（1）用多重PCR方法检测DMA基因缺失 选择了DMD基因两个缺失热点区内共18个易缺失外显子的旁侧顺序为引物，进行多重PCR扩增（即多对引物在同一PCR反应体系中扩增）??可迅速检出DMD基因缺失的98%以上。;外显子 ; 现经我室已做了7例DMD基因诊断，其中产前诊断3例，患者DMD基因诊断4例。; ;多重PCR扩增后电泳结果;（2）用PCR方法检测多态性位点 随DMD基因中多态性位点的发现及旁侧顺序的测定，现已开始用PCR方法扩增多态性位点区域，酶解扩增产物，电泳分后便可对多态性进行分析。;六、DMD基因诊断的一般程序;谢 谢！