_原生质体融合育种.ppt

第1节 微生物杂交育种 概念：杂交育种通过微生物杂交将不同菌株的遗传物质进行交换、重组，使不同菌株的优良特性集中于一个重组体中。 杂交育种缺陷： 只能利用已有的基因组，并不能产生新的基因； 杂交进程缓慢，过程繁琐，育种时间长； 只能进行本物种或亲缘关系较近的物种杂交，不能克服远源杂交不亲和的障碍。 第2节 原生质体融合育种 原生质体:脱去细胞壁的植物、真菌或细菌细胞。 第3节 原生质体融合育种的步骤 2.原生质体的鉴定 (2)荧光染色法：原生质体混悬液用荧光增白剂（VBL）染色，洗涤后在荧光显微镜下观察，发出红色光则为完全原生质体，发出绿色光则表明还有细胞壁成分存在。 （区别细胞壁与细胞膜的不同） ②酚藏花红染色法 活性原生质体能吸收酚藏花红染料而成红色，无活性的死细胞不能吸收染料呈白色;（吸收-呈色） 影响原生质体再生的因素（略） 菌体生理状态 稳定剂 酶浓度与酶作用时间 再生培养基的组成 原生质体的密度 …… （一）融合剂和融合手段 物理融合手段，电融合 细胞产生偶极化，原生质体相互粘连，细胞沿电力方向排列成串； 在外加瞬间高频直流强电压作用下，扰乱原生质体膜的分子排列，使之穿孔，然后发生原生质体膜复原过程，原生质体发生融合。 课堂活动 激光诱变育种 微波 离子束诱变、离子注入 航天 体外随机引物重组 外显子改组 酶法体外随机-定