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第 卷第 期 西 安 交 通 大 学 学 报 医 学 版
38 5 Vol.38No.5
年 月 ( )
2017 9 JournalofXi’anJiaoton Universit MedicalSciences Se.2017
g y p
◇技术方法研究◇
磁珠固定多抗预测最大吸附活性识别阳性突变体
, , ,
种慧敏 冯一然 杨晓兰 廖 飞
( , )
重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室 重庆 400016
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摘要 目的 考察磁珠固定多抗吸附细胞裂解液中酶 突变体 分析吸附酶活性对样品蛋白量响应曲线预测最大吸附
( ) 。 ( )
活性 用于比较识别阳性突变体的可靠性 方法 纯化重组表达大肠杆菌碱性磷酸酶 及绿脓杆菌芳香硫
Vs ECAP
( ) ; 。
酸酯酶 为免疫原 兔抗血清用 硫酸铵分级和 纤维素层析纯化得多抗 磁珠羧基活化后固定多
PAAS 33% DEAE-
; , ; 。
抗 用对硝基酚显色底物 碱终止后测定 吸收增量反映酶活性 分析吸附响应曲线预测 结果 多抗磁珠
405nm Vs
吸附酶的容量约 / 磁珠。 比活性超过 比活性 倍。 突变体 较野生型比活性提
2.0mgg ECAP PAAS 70 ECAP R168K
, ; ,
高约 用 多抗磁珠反应 即可预测 识别此阳性突变体 用 突变体 为起始酶 用
50% 2.5μg 10min Vs PAAS G138S
, 。
多抗磁珠测定吸附酶反应 后吸收预测 能识别活性提高
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