树鼩IL-2全长编码序列的克隆及分子特征分析-BiolineInternational.PDFVIP

动 物 学 研 究 2013，Apr. 34(2):121−126 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research DOI ：10.3724/SP.J.1141.2013.02121 树鼩 IL-2 全长编码序列的克隆及分子特征分析 1 2 1 3,4 1 1 1 1 黄晓燕 ，李明利 ，徐 娟 ，高跃东 ，王文广 ，殷安国 ，李晓飞 ，孙晓梅 ， 5 1,* 夏雪山 ，代解杰 1. 中国医学科学院/北京协和医学院 医学生物学研究所 树鼩种质资源中心 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室，云南 昆明650118 ； 2. 中国科学院昆明动物研究所 动物模型与人类疾病机理重点实验室：免疫生物学实验室，云南 昆明 650223 ； 3. 中国科学院昆明生物多样性大型仪器区域中心，云南 昆明 650223 ； 4. 中国科学院昆明动物研究所 遗传资源与进化国家重点实验室，云南 昆明 650223 ； 5. 昆明理工大学 生命科学与技术学院，云南 昆明 650500 摘要：树鼩作为多种人类疾病模型已受到广泛关注，而免疫因子对于树鼩模型评价至关重要，但目前对其白细胞介素-2(IL-2) 的研究鲜有报道。该实验以经 ConA (concanavalin)诱导培养的树鼩淋巴细胞总 RNA 为模板，RT-PCR 克隆出 465 bp 的树鼩IL-2 全长编码序列，并采用 Clustal W 软件分析其序列和分子特征。结果表明树鼩IL-2 cDNA 编码一个由 154 个氨基酸组成的蛋 白质，其cDNA 及氨基酸序列与人的同源性分别为 93%及 80%，且其整体结构与人IL-2 相似。MEGA5.0 软件构建的进化树 表明，树鼩与人及恒河猴的亲缘关系较近。Pymol 软件对树鼩和人 IL-2 氨基酸序列进行的三维结构模建表明，两者的 IL-2 分子三维空间结构基本相似，表面大部分区域所带电荷相同，但在某些区域差异较大，且树鼩多出一个糖基化位点，这些差 异对抗体的结合可能存在影响。该研究为今后树鼩 IL-2 单克隆抗体的制备及功能研究奠定了基础。 关键词：树鼩；IL-2 ；克隆；结构；功能 中图分类号：Q95-33 文献标志码：A 文章编号：0254-5853-(2013)02-0121-06 Analysis of the molecular characteristics and cloning of full-length coding sequence of Interleukin-2 in tree shrews 1 2 1 3,4 1 Xiao-Yan HUANG , Ming-Li LI , Juan XU , Yue-Dong GAO , Wen-Guang WANG , 1 1 1 5 1,* An-Guo YIN , Xiao-Fei LI , Xiao-Mei SUN , Xue-Shan XIA , Jie-Jie DAI 1. Center of Tree Shrew Germplasm Resources , Institute of Medical Biology, the Chinese Academy of Medical Science and Peking Union Medical College, Yunnan Key Laboratory of Va