2015版中国药典微生物检查方法及培养基变更参照.pdfVIP

2015版中国药典微生物检查方法及培养基变更参照 1. 无菌检查法 1.1变更内容 1.1.1无菌检查方面，使用胰酪胨大豆肉汤 （胰酪胨大豆液体培养基大豆酪蛋白肉汤培养基）/ 取代改良马丁培养基与硫乙醇酸盐流体培养基配合进行细菌和真菌的全面微生物检测。 1.1.2菌液制备环节，使用胰酪胨大豆肉汤、胰酪胨大豆琼脂取代营养肉汤、营养琼脂进行金 黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌和大肠埃希氏菌的菌液制备。 1.1.3菌液制备环节，使用沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基取代改良马丁培 基、改良马丁琼脂进行白色念珠菌和黑曲霉菌液的制备，同时对沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏 葡萄糖琼脂的配方进行了变更。 1.1.4适用性试验中，胰酪胨大豆肉汤使用枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉进行灵敏度检 查；硫乙醇酸盐流体培养基使用金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、生孢梭菌、铜绿假单胞菌进 行灵敏度检查。 1.2 培养基信息 2010版 2015版 无菌检查/菌液制备——硫乙醇酸盐流体培养基 无菌检查/菌液制备——硫乙醇酸盐流体培养基 无菌检查/菌液制备——改良马丁培养基 无菌检查/菌液制备——胰酪胨大豆肉汤 菌液制备——改良马丁琼脂培养基 菌液制备——胰酪胨大豆琼脂 菌液制备——营养肉汤 菌液制备——沙氏葡萄糖琼脂 菌液制备——营养琼脂 菌液制备——沙氏葡萄糖肉汤 无菌检查——0.5%葡萄糖肉汤培养基 无菌检查——0.5%葡萄糖肉汤培养基 供试品制备——0.1%蛋白胨水培养基 供试品制备——0.1%蛋白胨水培养基 供试品制备——pH7.0氯化钠—蛋白胨缓冲液 1.3 参考文件（国家药典委员会—中国药典2015版附录征求意见稿—1101 无菌检查法） /cms/newscenter/news/000603.html 2. 非无菌产品微生物限度检查 2.1 变更内容 2.1.1 供试品制备环节，除了pH7.0氯化钠—蛋白胨缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液、pH7.6磷 酸盐缓冲液外，添加了pH7.2磷酸盐缓冲液和胰酪胨大豆肉汤。 2.1.2菌液制备环节，使用胰酪胨大豆肉汤、胰酪胨大豆琼脂取代营养肉汤、营养琼脂进行金 黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、乙型副伤寒沙门氏菌和大肠埃希氏菌的菌液制 备；使用沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基取代改良马丁培养基、改良马丁琼脂 进行白色念珠菌和黑曲霉菌液的制备，同时对沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂的配方 进行了变更；使用梭菌增菌培养基取代硫乙醇酸盐流体培养基进行生孢梭菌菌液的制备。 2.1.3 微生物计数环节，使用胰酪胨大豆琼脂取代营养琼脂进行需氧菌计数；增加需氧菌的 MPN法计数，该方法使用胰酪胨大豆肉汤；使用沙氏葡萄糖琼脂取代玫瑰红钠琼脂进行霉菌 和酵母菌总数测定，同时增加玫瑰红钠琼脂、沙氏葡萄糖琼脂(含抗生素)两种选择性培养基于 对因沙氏葡萄糖琼脂上生长的细菌使霉菌和酵母菌的计数结果不符合微生物限度要求情况下 的霉菌和酵母菌计数；取消了使用酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)对酵母菌进行计数的 试验环节。 同时2015版中使用 “需氧菌”取代了以往的 “细菌”，从而使得胰酪胨大豆琼脂计数 所得不仅仅代表细菌，而是还包含真菌等其它在此培养基上生长的微生物菌落。 2.1.3 增加了耐盐革兰氏阴性菌的检验项目。 2.1.5简化了大肠埃希氏菌的检验流程。 2.1.6 取消了对大肠菌群的检验。 2.1.7变更了沙门氏菌检验中前增菌、增菌、分离用的所有培养基类别。 2.1.8 变更了铜绿假单胞菌检验中增菌、分离用的培养基类别，取消了绿脓菌素的直接试验。 2.1.9 取消了金黄色葡萄球菌的选择性增菌，改为无选择性增菌，同时变更了分离培养基。 2.1.10 3% 梭菌检验流程基本无变化，仅取消了对 过氧化氢酶试验的检验要求。 2.1.11 白色念珠菌的检验取消了牙管