一种通过体表注射斑马鱼性腺的简易投药方法.pdfVIP

文章编号：１６７４５５６６（２０１８）０１００２４０５ ＤＯＩ：１０．１２０２４／ｊｓｏｕ．２０１７０５０２０４７ 一种通过体表注射斑马鱼性腺的简易投药方法 １，２ １，２ １，２ １，２ 杜新路 ，吴嘉诚 ，陆　梦 ，严继舟 （１．上海海洋大学 水产与生命学院，上海　２０１３０６；２．上海海洋大学 水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室，上 海　２０１３０６） 摘　要：验证了一种简便易行的斑马鱼性腺体表注射方法。首先解剖 １０条成年斑马鱼，精确测量并勾画出 性腺的综合体表投影；然后注射阿尔新蓝染料确定注射路径和范围；再分别注射葡聚糖德克萨斯红和Ｓｏｘ９ａ ｍｙｃ过表达质粒与脂质体转染试剂混合物，４８ｈ后分别用荧光显微镜和免疫印迹法检测荧光分布和融合基因 表达。根据雄性斑马鱼平均体长、体宽和性腺的平均长宽，确定注射点位于斑马鱼胸鳍上端水平线与腹鳍前 端竖直线相交处向上０．１ｃｍ处。注射４８ｈ后，发现阿尔新蓝和葡聚糖德克萨斯红多存在于性腺内部，部分 标记了周围器官边缘部位；证实Ｓｏｘ９ａｍｙｃ蛋白在卵巢中大量表达。结果表明建立的斑马鱼性腺体表投影体 侧注射方法有效可行，为以后斑马鱼的体内基因调控研究提供了简便