硫代苄基半胱氨酸反应结晶工艺的研究.docVIP

—————————————————一———————————————————————————一一第十届全国煤炭分选及加工学术研讨会论文集 硫代苄基半胱氨酸反应结晶工艺的研究 孟献梁·褚睿智· 荀志金2范伟平2 (1．中国矿业大学化工学院江苏徐州221008) (2．南京工业大学制药与生命科学学院 江苏南京 210009) 摘要以l，，半胱氨酸为原料，用NaOH溶液作为反应介质，乙醇作为氯化苄的稀释 溶赉3，进行流加操作反应结晶制备硫代苄基半胱氨酸。通过正交试验获得最佳的合成条件 为：氯化苄流加速率为0．73 mL／min，半胱氨酸与氯化苄摩尔比为0．8：1．0，反应温度为 5 c，搅拌转速为250 r／min，产物收率为91．26％。扫描电镜分析结果表明，用乙醇作溶剂流 加操作下结晶形态远好于没加乙醇溶剂。 关键词硫代苄基半胱氨酸；流加操作；反应结晶 1引言 谷胱甘肽是一种重要的生物活性??肽，具有多种生物功能，它在医学、食品、保健、防衰 老等方面有着重要的应用。目前，谷胱甘肽的制备方法主要有萃取法、发酵法、酶法、化学合 成法，以上方法都有其不足之处“~3]，为此作者研究化学一酶法制备谷胱甘肽的技术。而化 学～酶法合成谷胱甘肽需要合成保护氨基酸前体一硫代苄基半胱氨酸(SBC)。文献报 道“一1可采用流加氯化苄(Bzl—C1)到半胱氨酸(Cys)的碱性水溶液中来制备，此制备过程是 一个反应结晶过程。但由于反应速度快而氯化苄不溶于水，产物SBC的结晶过程存在严重 杂质包裹现象。因此，笔者采用向半胱氨酸的NaOH碱性水溶液流加氯化苄乙醇混合溶液 反应结晶方法制备SBC．并对此反应结晶过程中主要影响因素进行了详细考察，通过正交实 验方法优化了反应结晶的条件。 2实验部分 2．1反应原理 反应原理如下： m一}Hr㈣+旷邺1帚OH-∞8盲H瓣。 ㈣ 这是一个双分子亲核取代SN2反应，但底物氯化苄不溶于水，难以离解，加入极性溶剂  硫代苄基半胱氨酸反应结晶工艺的研究 乙醇，既加速氯苄离解，又起助溶作用，将氯苄分子带入水相与亲核试剂接触反应。半胱氨酸 含--SH，硫醇是较醇酸性强的路易斯酸，在碱的作用下，易生成烷硫负离子与苄基进行亲核 加成反应，因此OH一是必要的因素。 2．2主要试剂 L一半胱氨酸盐酸盐无水物：纯度98％(TLC)，武汉汉龙氨基酸有限责任公司；氯化苄： 分析纯，上海双香助剂厂；乙醇：分析纯，南京化学试剂一厂；氢氧化钠：分析纯，上海凌峰化 学试剂有限公司；盐酸：分析纯，上海化学试剂有限公司。 2．3实验方法 三口烧瓶中加入氢氧化钠溶液，置于低温浴槽待冷却至OC～5 C后．加入L一半胱氨酸， 其完全溶解后，定量恒速流加氯化苄乙醇溶液，流加反应阶段低温浴槽控制反应温度在5 C 左右。流加结束后，升至室温继续反应约2 h，然后用1 mol／L的盐酸溶液调节反应液pH值 至5．50，冷却到5℃以下再经过滤、洗涤、干燥，得到产物。 2．4产物分析测定 产品熔点测定用北京市科仪电光仪器厂生产的XT4A型显微熔点测试仪测定；官能团 定性应用Nicolet 360FT--IR红外光谱仪KBr法检测；分子量鉴定应用英国VG公司的 zAB—Hs型有机质谱仪检测，采用电喷雾离子源；含量测定用美国Alltech公司生产的 HPLC检测，液相条件：色谱柱，Lichrospher C18，dp 5p，4．6 mm，ID×25 cm；波长220 nm； 流动相，80％水和20％甲醇，1 mL／min；进样量20止；晶体形貌采用日本产JSM--5900型 SEM进行了分析。 3实验结果与讨论 3．1氯化苄流扭液中乙醇用量对结晶形态的影响 乙醇对氯化苄的Sw2反应有着重要作用，乙醇的用量不仅影响氯化苄S。2的反应速率． 而且影响产物的扩散。当用氯化苄的乙醇溶液流加时，适当的乙醇用量可以减少产物沉淀包 裹的现象。氯化苄流加液中乙醇用量不同，所得产品结晶形态不同，经扫描电镜分析，结晶表 明，流加液中乙醇含量多少，明显影响晶体形态。图l的SEM分析图表明，流加液中氯化苄 ／乙醇比例为0．IO(V／V)时，结晶形态较好。而图2表明了流加液中缺少乙醇时，产品结晶 出现严重包裹、凝结现象。 3．2搅拌速率对晶体形态的影响 搅拌对结晶过程的成核和生长均有一定的影响，特别是晶体一搅拌器之间接触的能量 比其他种类的接触大得多，接触几率也高得多，因此搅拌器对接触成核的影响最为显著。为 了保证悬浮液中晶体均匀分布和防止局部过高的过饱和度产生，搅拌必须达到一定的强度， 而为了避免过量的晶核产生，搅拌转速又不能太高。图3～图5为不同搅拌转速对SBC晶体 形貌的影响。由图看出：图4的晶体形貌相明显好于图3、图5。这主要是由于当搅拌转速较 ·459·  第十届全国煤炭分选及加工学