方法驗證培訓.ppt

方法验证培训 培训目的 ：了解新方法的验证内容 。 主要内容： 方法验证的目的 ISO 17025对方法验证的要求 方法验证的内容 方法验证的目的 ： 在应用已验证的分析方法和其他法定方法/标准前，应在当前的实验室条件下进行方法确认，来证明方法在该实验室的适用性。 什么情况下要进行方法验证？ 首次运用检测方法时。 当检测标准发生变更涉及到检测方法原理、仪器设施、操作方法时，需要通过技术验证重新证明正确运用新标准的能力。 当实验室的能力发生改变时（如仪器设备，环境因素和人员发生重大变化等）。 ISO 17025对方法验证的要求 见5.4 .5　检测和校准方法及方法的确认 方法验证的内容 专属性 检测限 定量限 精密度 线性与范围 准确度 对比实验 耐用性 不确定度的评估 专属性 指在其它成分(如杂质、降解产物、辅料等)可能存在下，采用的方法能准确测定出被测物的特性。鉴别反应、杂质检查、含量测定方法，均应考察其专属性。如方法不够专属，应采用多个方法予以补充。常见于药物分析测试方法的验证。 检测限（LOD） 指某一分析方法在给定的可靠程度内可以从样品中检测待测物质的最小浓度或最小量。 重复分析一个空白溶液7次，乘以3 倍的标准偏差即得仪器检出限。或者由信噪比（信号强度s与噪声(或背景信号)强度 ）得出。 定量限（LOQ） 定量限则是指定量分析实际可以达到的极限。因为当元素在试样中的含量相当于方法的检出限时，虽然能可靠地检测其分析信号，证明该元素在试样中确实存在，但定量测定的误差可能非常大，测量的结果仅具有定性分析的价值。定量限在数值上总应高于检出限。 定量限是定量分析方法实际可能测定的某组分的下限。与检测限不同，定量限不仅受到测定噪声限制，而且还受到空白背景绝对水平的限制，只有当分析信号比噪声和空白背景大到一定程度时才能可靠地分辨与检测出来。 精密度 精密度（重复性）是指用该法测定同一匀质样品的一组测量值彼此符合的程度。如一个样品平行测试10次，得出它的结果。在分析中，常用相对标准(偏)差(RSD)，也称变异系数(CV)来表示。 线性与范围 分析方法的线性是在给定范围内获取与样品中供试物浓度成正比的试验结果的能力。换句话说，就是供试物浓度的变化与试验结果(或测得的响应信号)呈线性关系。所谓线性范围是指利用一种方法取得精密度、准确度均符合要求的试验结果，而且成线性的供试物浓度的变化范围，其最大量与最小量之间的间隔。目前仍广泛采用相关系数(r)表示标准曲线的线性度，并控制r≥O．9900。对照品的LOQ必须包括在线性范围内。 准确度 准确度是指测得结果与真实值接近的程度，表示分析方法测量的正确性。由于“真实值”无法准确知道，因此，通常采用回收率试验来表示。 其方法如下：?采用在样品中加入一定浓度的标准溶液，后按照标准进行测试得出结果的方法作回收试验。通常会多平行测试几个数据（如：7次以上），以保证回收率试验的可靠性。 对比实验 不同人员之间的比对测试 不同实验室间的比对测试 不同仪器之间的比对测试 耐用性 指分析方法中條件（如温度、气流量和气压等 ）有微小的改变时，分析结果的变化情况。 不确定度的评估 不确定度的含义是指由于测量误差的存在，对被测量值的不能肯定的程度。反过来，也表明该结果的可信赖程度。它是测量结果质量的指标。不确定度愈小，所述结果与被测量的真值愈接近，质量越高，水平越高，其使用价值越高；不确定度越大，测量结果的质量越低，水平越低，其使用价值也越低。在报告物理量测量的结果时，必须给出相应的不确定度，一方面便于使用它的人评定其可靠性，另一方面也增强了测量结果之间的可比性。 不确定度的评估 不确定度的来源： 称重引入的不确定度 样品定容时引入的不确定度 配制标准溶液引入的不确定度 测量重复性引入的不确定度 测量偏差引入的不确定度 仪器引入的不确定 不确定度的评估 不确定度的评估步骤 见DiBP的不确定度报告 完！ * * *