园艺植物生物技术实验指导.docVIP

园 艺 植 物 生 物 技 术 实 验 指 导 单 位 河 南 科 技 学 院 教 研 室 园 艺 植 物 遗 传 育 种 教 研 室 时 间 2 0 0 8 年 1 月 编 写 说 明 课 程 编 码 ： 0 6 0 0 0 1 7 课 程 教 学 总 学 时 ： 3 6 课 程 实 验 总 学 时 ： 1 0 总 学 分 ： 2 适 用 专 业 ： 园 艺 先 修 课 程 ： 植 物 学 ； 植 物 生 理 学 ； 园 艺 植 物 遗 传 学 一 、 目 的 与 任 务 实 践 课 堂 主 要 内 容 ， 了 解 生 物 技 术 相 关 实 验 设 施 ， 掌 握 生 物 技 术 基 本 实 验 操 作 ， 培 养 学 生 的 动 手 操 作 能 力 、 分 析 和 解 决 问 题 的 能 力 。 二 、 实 验 教 学 的 基 本 要 求 通 过 本 课 程 的 学 习 了 解 生 物 技 术 实 验 室 的 设 计 、 常 用 仪 器 设 备 的 基 本 操 作 ； 掌 握 园 艺 植 物 组 织 培 养 基 本 流 程 及 技 术 ， 初 步 掌 握 以 基 因 工 程 为 核 心 的 相 关 技 术 操 作 。 三 、 实 验 教 学 的 时 数 安 排 总 学 时 1 0 学 时 ， 各 实 验 学 时 数 分 配 见 下 表 ： 序 号 实 验 内 容 学 时 实 验 一 培 养 基 母 液 的 配 制 2 实 验 二 培 养 基 的 配 制 与 灭 菌 2 实 验 三 无 菌 操 作 技 术 及 植 物 组 织 培 养 2 实 验 四 园 艺 植 物 脱 毒 技 术 2 实 验 五 园 艺 植 物 D N A 提 取 技 术 2 实 验 一 实 验 一 实 验 一 实 验 一 培 养 基 母 液 的 配 制 一 、 实 验 目 的 通 过 配 制 M S 培 养 基 母 液 ， 掌 握 贮 备 液 的 配 制 和 保 存 方 法 。 二 、 实 验 原 理 配 制 培 养 基 时 ， 为 了 使 用 方 便 和 用 量 准 确 ， 通 常 采 用 母 液 法 进 行 配 制 ， 即 按 培 养 基 配 方 中 各 试 剂 的 用 量 ， 扩 大 若 干 倍 后 再 准 确 称 量 ， 分 别 先 配 制 成 一 系 列 的 母 液 置 于 冰 箱 中 保 存 。 使 用 时 按 比 例 吸 取 母 液 进 行 稀 释 配 制 即 可 。 以 M S 培 养 基 为 例 ， 所 需 配 制 的 母 液 为 ： 大 量 元 素 母 液 （ 母 液 Ⅰ ， 浓 缩 2 0 倍 ） 、 微 量 元 素 母 液 （ 母 液 Ⅱ ， 浓 缩 2 0 0 倍 ） 、 铁 盐 母 液 （ 母 液 Ⅲ ， 浓 缩 2 0 0 倍 ） 和 有 机 化 合 物 母 液 （ 母 液 Ⅳ ， 浓 缩 2 0 0 倍 ） 等 。 三 、 主 要 仪 器 设 备 和 试 剂 1 . 仪 器 设 备 ： 冰 箱 ， 天 平 ， 酸 度 计 ， 烧 杯 （ 5 0 m l ， 1 0 0 m l ， 5 0 0 m l ， 1 0 0 0 m l ） ， 量 筒 ( 1 0 0 0 m l ， 1 0 0 m l ， 2 5 m l ) ， 容 量 瓶 ( 1 0 0 0 m l ， 5 0 0 m l ， 1 0 0 m l ) ， 磨 口 试 剂 瓶 ( 1 0 0 m l ， 5 0 0 m l ， 1 0 0 0 m l ) ， 药 勺 、 称 量 纸 、 滴 管 、 玻 璃 棒 ， 电 炉 ， 微 波 炉 2 . 试 剂 ： N H 4 N O 3 , M n S O 4 . 4 H 2 O , K N O 3 , Z n S O 4 . 7 H 2 O , C a C l 2 . 2 H 2 O , N a 2 M o O 4 . 2 H 2 O , M g S O 4 . 7 H 2 O , C u S O 4 . 5 H 2 O , K H 2 P O 4 , C o C l 2 . 6 H 2 O , H 2 B O 3 ， N a 2 ? E D T A ? 2 H 2 O ， K I , F e S O 4 . 7 H 2 O ， 烟 酸 ， 甘 氨 酸 , 盐 酸 硫 胺 素 , 肌 醇 , 盐 酸 吡 哆 醇 , 蒸 馏 水 四 、 实 验 方 法 1 . M S 大 量 元 素 母 液 的 配 制 配 制 时 先 用 量 筒 量 取 蒸 馏 水 大 约 3 5 0 m l ， 放 入 5 0 0 m l 的 烧 杯 中 ， 按 照 配 方 表 中 用 量 依 次 分 别 称 取 ： N H 4 N O 3 , K