免疫溶血法检测单个补体成分的活性.ppt

1.已知补体的活化有三条途径，试述三条激活途径有何不同？ 2.试述补体在抗感染免疫中有何作用？ 3.补体有30余种成分，各自的作用不同但相互联系，补体的网络系统中起关键作用的成分是哪几个？ 4.补体在参与机体免疫系统效应中发挥的主要作用是什么？ 5.应用补体检测抗原抗体的方法有几种？有无你认为可以建立但尚无人提及的？ 6.补体在参与人类疾病的病理损伤中发挥什么作用？ 7.机体的免疫损伤或炎症多发生于什么情况下？损伤的机制是什么？ 8.试比较各种补体检测方法的优缺点和如何进行临床应用选择？ 9.补体缺陷所表现的主要临床特征是什么？ 10.补体的主要理化特点是什么？ 补体对照管： 受检血清 阳性:不溶血 阴性:溶血 注意: 若上述各对照管不出现预期结果，则试验结果不可靠，其可能原因应根据出错的对照管进行分析。 2个单位:全溶 1个单位:全溶或略带少许红细胞 0.5个单位:不发生溶血 三、方法评价 优 点 灵敏度高、所测定的抗体水平可达0.05μg/ml ， 出现交叉反应的机率较小， 可检测的抗原或抗体范围广泛， 无需特殊设备、结果容易观察、试验条件要求不高 现 状 影响的因素多、各种制剂需要烦琐的稀释和滴定等， 现代化、自动化抗原抗体检测方法的不断涌现，补体结合试验逐渐被遗弃 补体结合试验作为一种经典的免疫方法类型，其设计和原理仍对新型免疫方法的建立有着启迪和指导作用 第五节 补体受体的测定 补体受体： 存在于多种细胞 清除免疫复合物、净化机体内环境 检测补体受体，有助于判断机体抗感染能力和计 数相应的细胞数量 补体受体 目前已知的补体受体归为 以下五类： CR1（CD35） CR2（CD21） CR3（CD11b/CD18） CR4(gp150/95，CD11c/18) C3aR/C5aR 内皮细胞、肥大细胞、吞噬细胞 C5a/C3a(活化G蛋白) CD88 C5aR/ C3aR 中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、血小板 iC3b、C3d、C3dg CD11C/CD18 gp150/95 CR4 中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、NK细胞 iC3b、植物凝集素、某些细胞多糖 CD11b/CD18 iC3b受体、Mac-1抗原 CR3 B细胞、树突状细胞 iC3b、C3dg、C3d、EB病毒、IFN-α CD21 C3d受体，EB病毒受体 CR2 红细胞、中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、B细胞、树突状细胞、肾小球上皮细胞 iC3b、C3b，C4b、iC4b，C3c CD35 C3b受体，C4B/C3b受体 CR1 细 胞 分 布 配 体 CD分类 别 名 名 称 补体受体特性 第六节 补体测定的应用 补体相关试验： 诊断梅毒螺旋体感染的华氏反应（已淘汰） HLA分型的补体依赖性细胞毒试验 抗原抗体检测的脂质体免疫试验、免疫粘连血凝试验 抗体形成细胞定量检测的溶血空白斑技术 免疫复合物测定的胶固素结合试验和C1q结合试验 应用于补体含量和活性检测的试验 AP-CH50和AP-H50试验: 反映总补体活性 溶血试验 免疫化学试验 免疫荧光技术 检测补体单个成分及其裂解产物（C1q、C3SP 、C3、C4、B因子等）和补体受体 (图)血管神经性水肿 补体含量和活性相关的疾病 1．免疫相关性疾病： 如自身免疫性疾病时，C1、C2、C3、C4和Hf等缺陷； 超敏反应时（III型超敏反应），C3a、C5a等过敏毒素的产生。 2．与补体有关的遗传性疾病： ①C2、C3缺陷导致的严重感染； ②与C1抑制物缺陷相关的遗传性血管神经性水肿 ③SLE患者出现的细胞表面CR1缺陷与C1C清除障碍 ④涉及I因子、H因子缺陷的肾小球肾炎； ⑤DAF缺陷引起的阵发性血红蛋白尿； ⑥C1q缺陷表现的严重顽固性皮肤损害，以及C1q、C1r、C4、C2缺陷造成的 免疫复合物性血管炎（包括肾炎）等。 (图)血管神经性水肿 3．补体含量显著降低的疾病： ①消耗增多:免疫复合物形成导致的补体活