血小板抗原及其抗体检测ygc讲解课件.pptVIP

PLT抗体检测试剂盒 MACE I MACE II： － 交叉配型 － 规格：MACE? 1：45个测试/盒； MACE? 2：30个测试/盒。 － ELISA 方法检测IgG 抗体: MACE? 1 : GP IIb/IIIa and HLA-I。 MACE? 2 : GP Ia/IIa、 Ib/IX、 IV。 MACE?实验操作与原理 1 洗涤PLT,制备50%PLT悬液. 2 PLT与患者血清或血浆在管内发生反应,若有 相应抗体,则结合到PLT上形成复合分子. 3 洗涤去掉其中未结合的Ig. 4 裂解PLT,游离出抗原-抗体复合分子. 5 加裂解液到相应的微孔内,孔壁上包被的抗体可 结合(抓获)其中的抗原或抗原-抗体复合分子. 6 洗涤,去掉未结合的Ig. 7 加酶标二抗(anti-Ig),结合到抗原-抗体复合分子上,形成一条反应链;病人血液中无相应的抗体,则反应链不成立. 8 洗涤去掉未结合的二抗. 9 加底物显色. 10 终止反应,测OD值,判断结果. ELISA for Platelet Antibody Detection PAK?PLUS － 鉴定针对特异表位的抗体：5份样品/盒。 － ELISA方法检测针对特异表位的抗体(IgG,A,M): PAK?2-LE － 筛查针对常见HPA抗原蛋白的抗体：11份样品/盒。 － ELISA方法检测针对特异表位的IgG抗体: GP IIb/IIIa GP Ia/IIa GP Ib/IX HLA-I 固相红细胞粘附实验（SPRCA） AHG致敏红细胞作为指示细胞 Commercial Assay (Capture P) ; Rapid test。 敏感性和特异性低。 使用完整血小板作为抗原，不能分辨抗体类别 主观性比较强，通过红细胞的凝集作为判断标准。 试剂有效期短。 Capture-P? Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Capture-P? A specific platelet binding agent is covalently bound to the wells by the manufacturer. 孔内包被有血小板特异性结合试剂 Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Capture-P? Paternal platelets, donor platelets, or the patients platelets are added to the wells. 孔内加入父母、供者或病人的PLT Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Capture-P? The patients serum or antibody of known specificity is added to the wells. 孔内加入病人血清或已知的特异性抗体 Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Capture-P? Y Y Y Y Indicator cells consisting of red cells with attached rabbit anti-human are added. 添加结合有兔抗人IgG的指示RBC Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Capture-P? In the presence of anti-platelet antibodies, the red cells coat the well and a hazy pattern is seen. 阳性反应结果 Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Capture-P? In the absence of anti-pla