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茶 树 组 织 培 养杜 真 真南 雪 芹张 娜茶树组织培养1.1组织培养定义1.2茶树组织培养历史1969 年胜尾清对茶树花药培养,到1973年分化出了根1973 年中国农业科学院茶叶研究所开始花药培养1976 年吴振铎首次以祁门种子叶为外植体获得再生植株;1979年林知兴等诱导出单倍体根,诱导出了愈伤组织。 20 世纪 80 年代,Kato以茎作材料,从愈伤组织诱导再生植株。1981 年上井芳宪从花药形成的愈伤组织中分化出绿色小突起和根。1982年陈振光等首次从福云7号的花药培养中获得了完整植株。1.2茶树组织培养历史1988 年刘德华等用茶籽子叶进行培养,已获得完整植株。陈平等以种子胚为外植体,诱导了愈伤组织,并分化了丛生小苗,之后诱导生根,再生了植株。1989 年刘德华等首次以叶为外植体诱导、分化植株,并已初步建立了一套叶片诱导愈伤组织形成、植株再生的体系。王毅军等以茶树叶片为外植体,诱导出愈伤组织和胚状体,进一步形成了小植株。1995年下门久等通过茶树花药培养获得了单倍体植株。1.3茶树组织培养现状组织培养技术发展迅速。组织培养设施不断改进,规模不断扩大科研的常规方法与育种、种植、生产联系紧密广泛用于研究次级代谢和次级代谢产物生产1.3茶树组织培养现状1.3.3科研的常规方法组织培养成为研究植物遗传特性、生理、生化和病理学特点的常规方法1.3.4与种质、育种、生产联系紧密 种质资源保存 单倍体育种、胚培养、培养细胞突变体?、细胞融 合、转基因育种、脱毒苗的快速繁殖、 生产天然有机化合物,如蛋白质、脂肪、糖类、药 物、香料、生物碱及其他活性化合物2.2解决茶树育种问题 辅助育种、缩短育种周期:花药培养,获得单倍体植株;用秋水仙素快速、有效诱导茶树愈伤组织培育茶树多倍体;利用体细胞杂交技术,再利用组织培养技术培育一个棵完整的杂种植株;利用细胞水平上的诱变和筛选技术可以产生具有新性状的茶树品种。 随着转基因技术的日趋成熟,在育种研究中,一旦获得具有优良性状转基因植株,就可利用组培技术将植株迅速扩增为一个无性系,进一步用于研究或小区试验,这将大大的缩短育种进程 2.2解决茶树育种问题 快速繁殖:利用组织培养技术对植物进行快速繁殖,可以微型化、精密化,节约人力物力,可人为控制培养基中各种成分、环境条件,全年均可连续试验生产。 如:斯里兰卡茶叶研究所采用茶树新梢的顶芽和腋芽作为外植体,Sarathchandra等以田间植株的茎节为外植体,1年中从50个外植体得到了36153 个小植株;印度 Tata 茶叶有限公司利用组培快繁技术培育出了高产优质茶树,田间成活率达90%。参考文献:1.茶树组织培养研究进展[J].亚热带农业研究,20132.2解决茶树育种问题茶树人工种子 优点:(1)繁殖速度快;(2)与试管苗相比,人工种子节约培养基,成本较低,体积小,运输方便;(3)制作过程中可加入各种生长调节剂、有益的微生物或农药,从而可以人为控制茶树的生长发育与抗逆性;(4)可成为基因工程技术应用到生产中的桥梁:2.2解决茶树育种问题培育有特殊功能的茶树如:(1)低咖啡碱茶树;(2)高GABA(γ-氨基丁酸)茶树;(3)高甲基化酯型儿茶素茶树;参考文献:1.Prashant et al.(2010) Producing low-caffeine tea through post-transcriptional silencing of caffeine synthase mRNA.Plant Mol Biol2. 倪娟桢,等.γ-氨基丁酸茶的研究进展[J]茶叶,20143.Masanobu et al. (2010)Cloning of a Novel O-Methyltransferase from Camellia sinensis and Synthesis of O-Methylated EGCG and Evaluation of their Bioactivity. Agri. Food. Chem.2.3解决生产问题 组织培养生产茶树次生代谢产物:利用细胞培养生产有用次生代谢物如茶多酚、咖啡碱、茶氨酸等物质不仅是重要的植物天然产物,也是构成茶叶滋味、香气的特征品质成份,可广泛用于食品、医药等行业。 郭玉琼等利用茶树花药诱导产生的愈伤组织来测定次生代谢产物茶多酚的含量,发现花药诱导的愈伤组织都有合成多酚类物质的能力,且在 MS 和 SJ-1 培养基上的合成能力都很高,与茶树鲜叶中的多酚含量相当。参考文献:1.郭玉琼,等.茶树花药愈伤组织诱导及茶多酚含量测定[J].福建叶,20012.3解决生产问题 组织培养生产茶树次生代谢产物:利用细胞培养生产有用次生代谢物如茶多酚、咖啡碱、茶氨酸等物质不仅是重要的植物天然产物,也
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