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第十章植物种质资源的离体保存;一、定义
植物种质资源(又称品种资源、遗传资源或基因资源)是指携带各种不同遗传物质的植物总称,包括栽培,野生及人工创造的各种植物的品种或品系。是生物多样性的重要组成部分,是选育优质、高产、抗病(虫)、抗逆新品种的物质基础,是生物技术研究取之不尽的基因来源。
种质是亲代通过生殖细胞或体细胞传递给子代并决定固有生物性状的遗传物质。
种质资源保存是指在天然或人工创造的适宜环境条件下,贮存植物种质,使其保持生命力与遗传性的技术。 ;二、种质资源保存方式;珍宝岛国家级自然保护区;内蒙古科尔沁国家级自然保护区 ;龙门南昆山省级自然保护区 ;2、非原生态保存:是指种质保存于该植物原生态生长地以外的地方。
包括:
异地保存(种质圃或植物园保存)
种质库(种子)保存
离体(试管)保存等。
;华南植物园;种质资源离体保存;第一节 植物种质资源的常温限制生长保存;二、常温保存的方法和原理;2、生长抑制剂保存法
在培养基中加入生长抑制剂以减缓培养材料的生长,达到长期保存种质材料的保存方法。
生长调节剂:
脱落酸(ABA)、青鲜素、矮壮素(CCC)、多效唑等
使试管苗生长缓慢,生长健壮、叶色浓绿、移栽成活率高。;3、饥饿法
从培养基中减去1~2种营养元素,使植株缺乏相关营养而处于最小生长量。
4、矿物油覆盖法
使培养材料与空气隔绝,延缓生长。
5、低光照培养
适当减弱光照强度,缩短光照时间,进而减缓试管苗生长。
6、低压保存
降低培养材料周围气压,达到抑制生长的目的分为低气压与低氧压两种,保存原理相似。
7、干燥保存法
降低培养物水分,其生命活动就能延缓,这与传统的种子干燥储存类似。脱水和限制糖的供应量常被看成是一个正常种子成熟经历的类似过程。;第二节 植物种质资源的低温保存;二、低温保存的原理; 植物对低温的耐受力不仅取决于基因型,也是与它们起源和生长的生态条件有关。
正确选择适宜低温是保存后高存活率的关键。;三、低温保存的优点; 1、低温保存的技术操作简单。
以魔??为例,选取茎尖分生组织为外植体,建立试管苗无性系;选取生长健壮的、芽大小为1.5cm的材料移入保存培养基,于25℃,光照度1000lx,12h条件下培养一周;转入4℃黑暗中保存。材料每6个月继代培养一次,继代培养时,从形态、经济性状、生理生化等方面进行遗传稳定性鉴定。;泰坦魔芋; 2、植物种质资源低温保存时间长,保存的数量多。如葡萄在植株在9℃条件下,通过每一年转换一次新鲜培养基,可以保存15年之久,而在常温的条件下需要1-3个月转接一次,通过这种方法,在2m2实验室面积上保存了800个葡萄品种。而在田间需要1hm2土地。;一、物种资源超低保存的发展概况
二、物种资源超低温保存的原理
三、超低温保存的基本程序
四、超低温保存的实例;1.超低温保存发展;(一)超低温保存的原理;*;1、冷冻保护剂的特性
特点:易溶于水,对细胞无毒,容易从组织细胞中清除。
之所以能对生物组织起到一定的保护作用,原因是:
1、在溶液中产生强烈的水合作用,提高溶液的黏滞性,从而可在温度下降的同时降低冰晶形成和增长的速度。
2、增加细胞膜通透性,加速细胞内的水流到细胞外结冰,从而防止细胞内结冰造成的伤害。
3、冷冻前或冷冻期间,冷冻保护剂可以防止“溶液效应”的毒害。
4、冷冻保护剂还可能直接或间接地作用于细胞膜,减少冷冻对膜的伤害。;*;*;;;;;;;4、包埋玻璃化法超低温保存
是包埋脱水法与玻璃化法的结合,克服了玻璃化法和包埋法各自的缺点。
基本操作程序
预培养和包埋→玻璃化溶液脱水→液氮保存→化冻→恢复培养;;;;;四、超低温保存实例;*
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