实验六质粒dna的制备教学教程.pptVIP

实验六 碱变性法小量制备质粒DNA;一．实验目的;二．实验背景;The constructed E. coli plasmid pBR322.;;Relaxed circle;质粒类型;质粒的应用;;;差速离心;三、实验原理碱变性法基本原理;当以pH4.8的NaAc/KAc高盐缓冲液去调节其pH值至中性时，变性的质粒DNA又恢复原来的构型，保存在溶液中，而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构， 通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质－SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。而质粒DNA仍为可溶状态留在上清中。;四、操作步骤;;思考题;OC L CCC;