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育种的遗传学原理

telomeres (端粒): 真核生物染色体末端多次重复的短小序列 Human telomere: 5’-TTAGGGTTAGGG(TTAGGG)nTTAGGG-3’ 3’-AATCCCAATCCC-5’ 体细胞 干细胞 癌细胞 6. DNA 复制的忠实性 错配频率:10-8~-9,10-5,10-3~-4 Taq DNA Polymerase,Pfu DNA Polymerase 1。DNA plymerase 的校读功能 (Proof-Reading) 3’→5’ exonuclease activity 5ATGCTGCAATTACTTCGG 3TACGACGTTAATGAAGCCATGCGTAACGCAT5 5ATGCTGCAATTACTTCGG 3TACGACGTTAATGAAGCCATGCGTAACGCAT5 G C 5 AUGTCGATTGGCTAGACTGCTAGC 3 3 TACAGCTAACCGATCGGACGATCG 5 冈崎片段 原核生物(1000~2000), 真核生物(100~200) 7. DNA 的损伤修复 Damage Repair 由于紫外线等外界理化因素导致DNA损伤 直接修复 切除修复 修复机制还有错配修复 重组修复 SOS修复等 SOS修复(应急修复) 是生物在DNA受到损伤或DNA复制受到抑制等紧急情况是为求生存而出现的应急效应,除DNA修复功能外其突出特点是诱导产生无校对功能的DNA聚合酶,从而导致突变率升高。 研究发现大多数导致细菌SOS修复机制的因素(如 对动物是致癌的,因此导致细菌SOS修复是初步判断致癌作用的简化方法。 8. DNA 的重组 8.1 同源重组 8.2 位点特异性重组 8.3 转座重组、基因横向迁移等 位点特异性重组: 8.2 l-噬菌体的整合与切离 约有15个碱基相同 基因工程中常用的整合型载体主要是利用位点特异性重组 免疫球蛋白基因的重排(旧书P405~407) 免疫球蛋白有几百万种而基因只有几万条,这一矛盾如何解决。 免疫球蛋白VDJ重排 动物细胞分化过程中经常发生基因的重排/扩增/丢失等变化,因此曾认为动物体细胞不具有全能性 8.3 转座重排 Transposon,Transpotase 转座子是一种可以在染色体不同部位间转移的DNA序列,一般由两个重复顺序夹着一个或多个结构基因构成。 是20世纪40年代由MacClintock B在研究玉米遗传因子时发现的。 MacClintock 发现玉米的一些突变非常不稳定,变化频率无法用正常突变解释,经多年研究,她认为,这些变异源于一些遗传片段的位置的转移。 60年代后人们陆续在其他生物中发现类似现象并引起重视。 事隔32年才于1983年被授予诺贝尔奖。 * 第2、3章 工业微生物育种的遗传学原理 1。The genetic Material is DNA 1928,Griffith, Diplococcus pneumoniae, Transformantion IIIS+IIR Only IIR IIIS+IIR IIIS+IIR 1944,Avery 微生物B 微生物A DNA 转化 DNA 微生物A+B’ 提取 酿酒酵母 许旺酵母 DNA 转化 酿酒酵母:高产酒精 许旺酵母:分解淀粉(淀粉酶基因) 利用淀粉的酿酒酵母 Plasmid,质粒 转化条件 直接转化,原生质体,电转化,CaCl2,醋酸锂,碱金属 亲缘关系 酿酒酵母, 假丝酵母(Candida),毕赤酵母(Pichia), 嗜热脂肪芽胞杆菌 2. Structure of DNA and RNA(DNA和RNA 的结构) 3。两条DNA单链形成右旋的双螺旋结构 实际工作中经常省略磷酸-核糖骨架 5’-ATGTTCGTTAGCTAGG-3’ 3’-TACAAGCAATCGATCC-5’ 进一步可以简写成一条链: 5’-ATGTTCGTTAGCTAGG-3’ 或 ATGTTCGTTAGCTAGG(Yes) TACAAGCAATCGATCC(No) 3’-TACAAGCAATCGATCC-5’ DNA 的方向性 DNA分子由两条脱氧核糖核酸长链互以碱基配对相连而成。 例: 5’-ATGGCTAAGTCAGG-3’ 3’-TACCGATTCAGTCC-5’ 两条链以相反方向排列 5’-ATGTTCGTTAGCTTAAG-3’ 3’-TACAAGCAATCGAATTC-5’ 5’-ATGTTCGT

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