抗牛边缘无浆体MSP5单克隆抗体的制备及鉴定.pdfVIP

牛羊马传染病 5小结与讨论 根据严重肺炎和关节炎的临床特点、牛支原体检测阳性以及抗支原体药物有效的结果，作者认 bovis)引起。该批牛经长途运输、饥渴和环境改变等因素 为本次疫情主要由牛支原体(Mycoplasma 的应激，导致牛群急性暴发，发病率80％以上。真菌、大肠杆菌和葡萄球菌的继发感染进一步加重 了病情，加之用药不合理，增加了死亡率。 牛支原体于1961年从患乳房炎病牛中首次分离到，可以引起牛的肺炎、关节炎、乳房炎、角膜 结膜炎。研究显示牛支原体是牛呼吸道疾病的主要病因，而且还可明显增加其他病原的继发感染。 牛支原体已成为欧洲和北美牛群中呼吸道疾病和多发性关节炎的重要病原，造成了严重的经济损失。 目前。国内其他省市已有牛支原体肺炎的报道。而近年来，我国奶业和肉牛产业发展较快，牛群调 运频繁，该病传播扩散的风险很高。提示各级兽医部门必须提高对牛支原体肺炎的认识，重视对该 病的防控。 牛支原体肺炎在临床上很容易与牛传染性胸膜肺炎(牛肺疫)混淆，只有通过病原分离鉴定才 能准确区分。后者是由丝状支原体丝状亚种(Mycoplasmamycoides 定通报的传染病，在我国已经消灭。一旦发现，必须立即采取严厉而果断的措施。对近两年新出现 的牛支原体肺炎，必须加强研究和技术储备。各地特别是养牛业较为发达的地区，应尽快建立快速 鉴别诊断方法，以便及时确诊，采取相应防控措施。 致谢：感谢辛九庆副研究员和刘思国副研究员对PCR检测的支持。 参考文献(謦) 抗牛边缘无浆体MSP5单克隆抗体的制备及鉴定 倪宏波1·2姜海芳2周玉龙2王春仁2辛九庆3刘思国3宫大庆2钱爱东1 (1岩林农业大学动物科技学院，吉林长春130118：2．黑龙江八一农垦大学动物科技学院，大庆黑龙江163319；3． 中国农科院哈尔滨兽医研究所，哈尔滨黑龙江150001) 叠加试验表明两株MAb识别的抗原位点相同或相近；w色stemblot结果显示2株MAb均能与重组表达的MSP5发生 反应。特异性抗MsP5的MAb的获得，为进一步用于I临床诊断研究奠定了基础。 关键词 边缘无浆体；MsP5；单克隆抗体 牛无浆体病(Dia叮cattleA砸p肠劂∞括)，过去称边虫病，主要是由边缘无浆体经蜱传播的专性寄 生于红细胞内的血液传染病Il丑J。边缘无浆体(A，l印肠J耽l，，獬信加口如)属于立克次氏体目，无浆体科 (AMp肠jm口砌cP钾)，无浆体属(A唧肠s，加)，是一类专性寄生于脊椎动物红细胞中的无固定形态的 微生物。1910年和1911年首次在北非发现了边缘无浆体和中央无浆体病13“】，此后发现无浆体病在 世界各地广泛流行，其中边缘无浆体的危害最大，它在急性病程中常引起动物严重贫血、体重下降、 高烧、流产、产奶量下降，甚至死亡p’6J。在我国部分省市也开展了对该病的流行病学调查，证实了 J。 在牛群中存在不同程度的感染17 本试验的目的是制备抗牛边缘无浆体MSP5蛋白的单克隆抗体(MAb)，为进一步在边缘无浆体 病的检测方法的建立、免疫功能检测以及免疫机制研究等方面的研究奠定基础。 1材料和方法 1．1主要材料 SPF级BALB，c 表达MSP5的重组质粒pQE30．MSP5、SP2旧骨髓瘤细胞均由本实验室保存； 小鼠购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心；sBA Clono哆ping。MSyste删HRP试剂盒 1308 第十三次学术研讨会会议论文集 显色试剂盒购等购自美国栅sco公司；胎牛血清、删l“0购自Gibco公司；抗牛重组边缘无 浆体MSP5的鼠阳性血清由本实验室制备。 1．2重组MSP5的纯化 mmo儿的prG诱导表达，菌体超声波 含pQE30．MSP5重组质粒的E∞!l】BL2l经终浓度为4．0 裂解后用Ni．NrAHis．Bind@Resins对表达的重组MSP5(rMSP5)进行纯化。