[理学]紫外可见光谱.pptVIP

2. ???*和n ??*跃迁 在含有不饱和键如双键和三键等有机化合物中含有?电子，可以发生???*跃迁。若形成不饱和键的原子含有非键电子则能发生n ??*跃迁 。 ?电子和n电子比较容易被激发， ?*轨道的能量又比较低，所以由这两类跃迁所产生的吸收峰波长一般都大于200 nm。有机化合物的紫外-可见吸收光谱法的分析就是以这两类跃迁为基础。这两类跃迁都要求化合物中含有不饱和官能团以提供?轨道。因此，把含有键的不饱和基团称为生色团。 1,3丁二烯的π分子轨道 芳香族化合物的紫外光谱具有由???*跃迁产生的三个特征吸收谱带。例如，苯在184 nm、204 nm和254 nm处均有吸收带。苯的这三个特征吸收带受苯环上的取代基的强烈影响。 青霉素的紫外吸收谱 1.d-d配位场跃迁 金属离子在溶液中与水或其他配位体形成络合物时，受配位体配位场的影响，原来能量相同的d轨道会发生能级分裂，这样d轨道之间就会产生能量差，络合物就可以吸收适当波长的辐射能，发生d-d跃迁。吸收光的波长取决于分裂能的大小。因此，这种光谱强烈地受到配位体性质地影响。配位体地配位场越强，d轨道分裂能就越大，吸收峰波长就越短。 氢灯和氘灯。它们可在180 ~ 375 nm范围内产生连续光源。 在紫外光区只能用石英比色皿。紫外—可见分光光度计通常都配有可见和紫外两种光源。 4.聚焦透镜或聚焦凹面反射镜聚焦，它使 不同波长的光聚焦在焦面的不同位置。 5.出射狭缝。 作用：将光源发出的连续光谱分解为单色 光的装置。 光电管将光强度信号转换成电信号的过程是这样的：当一定强度的光照射到阴极上时，光敏物质要放出电子，放出电子的多少与照射到它的光的大小成正比，而放出的电子在电场的作用下要流向阳极，从而造成在整个回路中有电流通过。而此电流的大小与照射到光敏物质上的光的强度的大小成正比。这就是光电管产生光电效应的原理。光电倍增管：它是一个非常灵敏的光电器件，可以把微弱的光转换成电流。其灵敏度比光电管高得多。它是利用二次电子发射以放大光电流，放大倍数可达到108倍。 （一）单光束分光光度计 2.吸收波长和摩尔吸收系数：由于不同的化合物，如果具有相同的发色基团，也可能具有相同的紫外吸收波长，但是它们的摩尔吸收系数是有差别的。如果样品和标准物的吸收波长相同，摩尔吸收系数也相同，可以认为样品和标准物是同一物质。 标准曲线法 配制一系列不同浓度的标准溶液，在λ最佳处分别测定标准溶液的吸光度A，然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线，在完全相同的条件下测定试液的吸光度，并从标准曲线上求得试液的浓度。该法适用于大批量样品的测定。 吸光度A与浓度c 的关系 分子荧光光谱法Molecular fluorescence spectroscopy 荧光光谱法基本原理 分子的激发与失活 1. 分子的多重态 单重态 一个所有电子自旋都配对的分子的电子状态。大多数有机物分子的基态是单重态。当基态一对电子中的一个被激发到较高能级，其自旋方向不会立刻改变，分子仍处于单重态。 三重态 有两个电子的自旋不配对而平行的状态。激发三重态能量较激发单重态低。 1. 荧光强度与浓度的关系 F = K′（I0—I） I0——入射光辐射功率； I——透射光辐射功率； 2. 荧光量子产率Φ 物质分子发射荧光的能力用荧光量子产率（Φ）表示： 荧光与结构的关系 （1）电子跃迁类型 发射 π*→π跃迁比π*→n跃迁更常见 （2）共轭效应 芳香族化合物的荧光最常见且最强，大多数未取代芳烃在溶液中发荧光，随着环的数目和稠合程度增加，荧光峰红移，Φ↑。简单杂环化合物不发荧光，但具有稠环结构的杂环化合物都发荧光。 （3）平面刚性结构效应 有刚性结构的分子容易发荧光，刚性和共平面性的增加有利于荧光发射。 荧光与环境因素的关系 ★温度降低会使荧光强度增大； ★带有酸性或碱性取代基的芳香化合物的荧光与pH有关； ★溶剂 溶剂极性增加有时会使荧光强度增加，荧光波长红移；若溶剂和荧光物质形成氢键或使荧光物质电离状态改变，会使荧光强度、荧光波长改变；含重原子的溶剂（碘乙烷、四溴化碳）使荧光减弱。 ★溶解氧的存在往往使荧光强度降低。 激发光谱和荧光光谱 荧光分析仪器和荧光法的应用 荧光分光光度计 荧光分光光度计既可用于定量分析，也可用于测绘激发光谱和荧光光谱。第一单色器选择激发光波长（＞250nm的紫外光），故称为激发单色器。第二单色器（荧光单色器）与激发光入射方向垂直，并选择荧光波长，可提高方法的选择性和准确度。