TS-7(JY)2017013异烟肼片微生物限度检查方法确认方案.docVIP

项目负责人：QC主管 确认类别：方法验证 确认小组主要成员： 部 门 质量部 质量部 质量部 质量部 质量部 质量部 姓 名 职 位 QC主管 验证管理员主题内容 本方案规定了异烟肼片微生物限度检查方法的验证方法及标准。 验证概述 我公司生产异烟肼片微生物限度检查项目为需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、大肠埃希菌。参照《中国药典》2015版四部附录1105：微生物计数法，以及1106：控制菌检查法的规定，本公司对该产品的微生物限度检查方法予以验证。通过验证以确认所采用的微生物限度检查方法适用性。 异烟肼片处方中含有异烟肼以及常用辅料成分，异烟肼对细菌有抑菌特性，对霉菌和酵母菌无抑菌活性。异烟肼在水中易异烟肼片微生物限度检查方法适用性 菌产品微生物限度检查：控制菌检查法。 验证目的（mg） 部 门 人员 职责及分工 质量部 QC检验员 负责根据验证方案对微生物限度方法进行适性 验报告。 QA主管/验证管理员 负责验证文件的审核现场对操作过程进行指导。对验证实施过程中资料和数据进行汇总并完成验证报告。受权人组织验证工作的实施及各部门的协调， 批准。 验证内容 验证前准备 文件准备 现场备《微生物限度检查法SOP》、《培养基及检定菌管理规程》、《药品微生物限度检查方 法确认方案》及相关的验证记录，并填写验证文件准备验证表（附表1）。 验证主要仪器准备：经检定或确认合格并处于有效期内的需氧菌培养箱、霉菌和酵母菌培养箱、生化培养箱、温度计等，填写《主要检验仪器设备 检查微生物限度检查室空调系统已经确认并合格、用于灭菌的高压蒸汽灭菌器已经确认并合格、超净工作台、生物安全柜等已经确认并合格，填写《确认相关确认记录表》，见附表3。 确认验证用试剂、培养基等的有效期 确认验证用试剂、培养基等在有效期内且质量符合要求，培养基经适用性检查应符合规定。确认情况填写《试剂、培养基确认表》，见附表4。 检定菌确认 确认用于试验的检定菌在有效期内并生长良好，传代代数不超过第五代。确认情况填写《检定菌确认表》，见附表5。 培训 确认方案起草人在方案批准后对本次确认相关人员进行培训，并记录在相关附件中。如果在确认中涉及到其他培训，培训记录的复印件附在确认报告中。记录见 附表6 培训记录。 验证方法： 供试品计数方法适用性试验 试验菌液的制备和使用表 试验菌株 试验菌液的制备 需氧菌总数计数 霉菌和酵母菌总数计数 金黄色葡萄球菌〔CMCC(B)26003〕 胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基，培养温度30～35℃，培养时间18～24小时 胰酪大豆胨琼脂培养基，培养温度30～35℃，培养时间不超过3天，接种量不大于100cfu 铜绿假单胞菌〔CMCC(B)10104〕 胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基，培养温度30～35℃，培养时间18～24小时 胰酪大豆胨琼脂培养基，培养温度30～35℃，培养时间不超过3天，接种量不大于100cfu 枯草芽孢杆菌〔CMCC(B)63501〕 胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基，培养温度30～35℃，培养时间18～24小时 胰酪大豆胨琼脂培养基，培养温度30～35℃，培养时间不超过3天，接种量不大于100cfu 白色念珠球菌〔CMCC(F)〕98001] 沙氏葡萄糖琼脂培养基或沙氏葡萄糖液体培养基，培养温度20～25℃，培养时间2～3天 胰酪大豆胨琼脂培养基，培养温度30～35℃，培养时间不超过5天，接种量不大于100cfu 沙氏葡萄糖琼脂培养基，培养温度20～25℃，培养时间不超过5天，接种量不大于100cfu 黑曲霉〔CMCC(F)98003 沙氏葡萄糖琼脂培养基，培养温度20～25℃，培养时间5～7天，或直到获得丰富的孢子 胰酪大豆胨琼脂培养基，培养温度30～35℃，培养时间不超过5天，接种量不大于100cfu 沙氏葡萄糖琼脂培养基，培养温度20～25℃，培养时间不超过5天，接种量不大于100cfu 需氧菌总数检查、霉菌和酵母菌总数检查方法的 接种白色念珠菌的新鲜培养物至10ml中，2～2℃培养～，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，稀释至10-5～10-7，～总数检查、霉菌和酵母菌总数检查方法验证 试验组：取1：10的供试液6.2.1.2项下制备的50～℃的胰酪大豆胨琼脂培养基20ml混匀，每株试验菌株平行制备2个平皿。置30～35℃培养箱中培养3天（金黄色葡萄球菌、、枯草芽孢杆菌1：10的供试液6.2.1.2项下制备的50～ 皿中，立即倾注不超过45℃的沙氏葡萄糖琼脂培养基20ml混匀，每株试验菌株平行制备2个平皿。置20～25℃培养箱中培养5天，点计菌