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第三章 无菌技术PPT
第3章 无菌技术;无菌是细胞培养成功的最基本要求;一、常用灭菌方法及原理;（一）热力（高温）灭菌;根据微生物生长发育与温度的关系，可将微生物划分为低温性微生物、中温性微生物和高温性微生物三大类。不同温度型的微生物对高温的抵抗力不同。当环境温度超过微生物生长的最高温度范围时很容易死亡。
一般说来，处于营养生长期细胞耐热性差，处于休眠状态的细胞，如各类（细菌）芽孢、（真菌）孢子耐热性较强。
灭菌彻底与否，一般以杀死芽孢或孢子为标准。
;1、湿热灭菌法(高压蒸气灭菌法);培养基的灭菌;其它常用湿热灭菌法
1）常压蒸气灭菌法：在常压条件下，采用100 ℃流通蒸气加热杀灭微生物，灭菌时间通常为30-60分钟。该法适用于消毒不耐高热制剂的灭菌，但不能保证杀灭所有芽孢，是非可靠的灭菌方法。
2）间歇灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽加热，杀灭所有微生物??包括芽胞。方法同流通蒸汽灭菌法，但要重复3次以上。
3）煮沸灭菌法：适用于应急需要的情况下，金属器械、玻璃及橡胶类物品的灭菌。在水中煮沸至100℃后，持续15～20分钟。此方法可杀灭一般细菌。针对带芽胞的细菌需每日至少煮沸1～2小时，连续3天才合要求。;2、干热灭菌法;接种工具、容器的灭菌;;热力灭菌的优势：
快速高效；简单易行
;（二）过滤灭菌;;（三）紫外线消毒;（四）化学灭菌;1、氧化消毒剂;2、重金属盐类消毒剂;3、表面活性消毒剂;4、甲醛;二、常见污染原因和预防措施;预防措施;;;;三、实验室生物安全;
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