2.1《微生物的实验室培养》(共38张PPT)PPT.ppt

1.无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 无菌操作是培养微生物成功的关键！ （1）消毒定义： 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2）灭菌的定义： 是指杀灭病原微生物的方法。 是指杀灭或清除环境中一切微生物（包括芽胞、孢子）的方法 a.灼烧灭菌 3.常用灭菌的方法 b.干热灭菌： 160-170℃ 下加热1-2h。 c.高压蒸气灭菌： 100kPa、121℃ 下维持15-30min. 取2个250ml的三角瓶中分别装入50mlLB液体培养基和50mlLB固体培养基（刚配好，尚未凝固），加上封口膜，牛皮纸包装后高压锅灭菌15min。 LB液体培养基——细菌的扩大培养 LB固体培养基——细菌的划线分离 灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入4个培养皿中，倒后立即置于水平位置上，轻轻晃动，使培养基铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 将斜面上培养的大肠杆菌菌种接种到灭菌后的液体培养基中，使其在37℃摇床培养12小时。 注意事项: 1.火焰旁从斜面上用接种环取菌； 2.取菌前接种环要用酒精灯灼烧灭菌，冷却后方能取菌； 3.取菌后封口膜和棉塞复原。 1.平板划线法： 1）灼烧接种环； 2）接种环冷却后，蘸取带菌培养物； 3）在近火焰处，让带菌接种环在固体培养基上划线。 注意事项: 1.接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次。 2.划线首尾不能相接。 3.划线后，培养皿倒置培养12~24h。 1 1.线条不重叠 2 2-3.从上次的末端开始，交叉2~3条线 3 4 4.最后的划线不能与第一区相连。 学习目标 新课导入 微生物 1 培养基 2 无菌技术 3 1 基础知识 微生物 1 培养基 2 无菌技术 3 制备牛肉膏蛋白胨培养基 1 倒平板操作 2 大肠杆菌的扩大培养 3 微生物的接种技术 4 大肠杆菌分离后保存 5 实验操作 2 制备牛肉膏蛋白胨培养基 1 倒平板操作 2 大肠杆菌的扩大培养 3 微生物的接种技术 4 大肠杆菌分离后保存 5 自我检测 课题1：微生物的实验室培养 1.了解有关培养基的基础知识； 2.掌握无菌操作技术； 3.了解纯化大肠杆菌的基础知识。 霉 菌 细 菌 酵母菌 放线菌 上图都是一些常见的微生物，微生物是结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，与人类关系密切。人工的培养和分离，使得我们更进一步认识微生物。 今天我们就来学习如何培养和分离大肠杆菌！ 2.微生物包括五类 病 毒 细 菌 放线菌 真 菌 原生动物 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 固体培养基 液体培养基 半固体培养基 1.培养基的类型 成分区别：琼脂 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 细菌喜荤，霉菌喜素 大肠杆菌配方 酵母提取物：0.25g 蛋白胨：0.5g Nacl：0.5g 琼脂：1g 水：50ml 3.培养基内所含的基本物质 ①一般营养物质水、碳源、氮源、无机盐 ②其他物质pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。 4.培养基的用途 液体培养基：增菌、工业生产 固体培养基：纯化（分离），　　　　　　鉴定、活菌计数、　　　　　　保藏菌种 半固体培养基：动力检测 学习目标 新课导入 微生物 1 培养基 2 无菌技术 3 1 基础知识 微生物 1 培养基 2 无菌技术 3 制备牛肉膏蛋白胨培养基 1 倒平板操作 2 大肠杆菌的扩大培养 3 微生物的接种技术 4 大肠杆菌分离后保存 5 实验操作 2 制备牛肉膏蛋白胨培养基 1 倒平板操作 2 大肠杆菌的扩大培养 3 微生物的接种技术 4 大肠杆菌分离后保存 5 自我检测