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《高级仪器分析技术》实验;目录;《高级仪器分析技术》实验一;一、电导率仪的使用;液体中的电流流动;电导率;物理意义;应用领域;测量原理 - 电导式测量原理;测量原理 ;电导率仪;仪器测量原理;影响因素;;;电导率测量为什么需要温度补偿?;; 下表列出了常用溶液的α值。要得到其他溶液的α值，只要测量某个温度范围内的电导率，并以温度为纵轴绘出相应的电导率的变化曲线，与标准温度相对应的曲线点为该溶液的α值。 ;使用方法;电极常数选择;校正方法;维护保养及注意事项;;;电导电极的贮存与清洗;;二、水的纯度测定; 实验原理 　水的纯度取决于水中可溶性电解质的含量。由于一般水中含有极其微量的Na+、K+、Ca2+、Mg2+、CO32–、Cl–、SO42–等多种离子，所以，具有导电能力。离子浓度愈大，导电能力越强，电导率越大；反之，水的纯度越高，离子浓度愈小，电导率越小。因此通过测定电导率可以鉴定水的纯度。;实验数据 测量25℃、40℃、60℃的5种水样的电导率并记录。;;《高级仪器分析技术》实验二;一、722型分光光度计的使用;1．仪器性能的检查 （1）预热：接通电源，让仪器预热至少二十分钟，使仪器进入热稳定工作状态。 （2）调零：仪器接通电源后，即进入自检状态。显示器实时显示仪器的自检状态。当仪器发生故障时，显示器会自动显示故障位置。自检结束，仪器自动寻找光源最大能量，查找完毕，仪器自动停留在420 nm处，并自动调100%T和0%T。显示器上显示420 nm和“100.0%T”。仪器此时进入测试状态。 ;2．使用方法 （1）按“方式键”（Mode）将测试方式设置为吸光度方式。 （2）调节波长设置想要的分析波长420nm。 （3）将参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中。注意比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米，大约2.5毫升；被测试的样品中不能有气泡和漂浮物。 ;（4）打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖。注意：一般情况下，参比样品放在样品架的第一个槽位中；仪器所附的比色皿，其透视率是经过测试匹配的，未经匹配处理的比色皿将影响样品的测试精度；比色皿的透光部分表面不能有指印和溶液痕迹。 （5）将参比溶液推入光路中，按“100%T”键调整零吸光度。 （6）将被测溶液推或拉入光路中，此时，显示器上所显示的是被测样品的吸光度数值。;二、磺基水杨酸显色法测定铁; 实验原理 伯朗－比尔定律 ; 本实验选用磺基水杨酸（简写为H3R）与 Fe3+形成的配位平衡体系， H3R和Fe3+等试剂 与配合物的吸收光谱不重合，因此可用分光 光度法测定。因溶液pH的不同，形成配合物 的组成也不同。 ;;;实验原理;;;　　　表1 作工作曲线所配的系列溶液;;实验结果;标准溶液是否要准确移取？ 加NH4Cl的作用是什么？ 为什么要用氨水滴至溶液呈黄色？ 实验中若 （1）每个溶液的浓度都不一样 （2）温度有较大的变化 （3）比色皿的透光面不洁净 将对测定稳定常数有何影响？ ;《高级仪器分析技术》实验三;;什么是电泳技术？;电泳技术的分类;做琼脂糖凝胶电泳的目的;琼脂糖凝胶电泳：实验原理;DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动。 DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时，有电荷效应与分子筛效应。不同DNA的分子量大小及构型不同，电泳时的泳动率就不同，从而分出不同的区带。 DNA 分子的迁移速度与相对分子质量的对数值成反比关系。凝胶电泳不仅可分离不同相对分子质量的DNA ，也可以分离相对分子质量相同，但构型不同的DNA 分子。;琼脂糖凝胶电泳特点;琼脂糖凝胶的配制;4.?使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5ug/ml，并充分混匀——不提倡使用。注意：溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时，请戴用手套。溴化乙锭在可见光下会分解。 5. 将琼脂糖溶液倒入制胶模中，然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3－5 mm 之间。 注意：不要产生气泡，溶液温度太高(60℃)，会使得水分过分蒸发，改变凝胶离子浓度，影响电泳效果。 6. 在室温下使胶凝固（大约30 分钟），然后放置于电泳槽中进行电泳。注意： 凝胶不立即使用时，用保鲜膜将凝胶包好在4℃下保存，或者放在制胶的缓冲液中，一般可保存2～5 天。;琼脂糖凝胶缓冲液;;琼脂糖凝胶载样缓冲液;;;影响电泳迁移率的因素;DNA分子的大小;凝胶的浓度;;DNA的构象;DNA电泳常见问题分析;;;二、琼脂糖凝胶电泳操作;;水平电泳槽和梳子;伯乐公司（bio-rad）电泳仪 ;凝胶/电泳槽;凝胶成像系统; 制胶;④胶板的制备：将有机玻璃胶槽两端分别用橡皮膏紧密封住。将封好的胶槽置于水平支持