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实验三 血红蛋白测定
实验三 血红蛋白测定 比色法 原理 血液与冰醋酸作用后,释放出血红蛋白,并被酸化后变为褐色的高铁血红蛋白,与标准柱相比,求出每百毫升血液中血红蛋白的克数或百分数。 器材和试剂 1 沙利氏血红蛋白计一套。在测定管上有两种刻度,一侧表示血红蛋白在每百毫升血液内的克数,另一侧表示百分数。 2 2%冰醋酸一小瓶。 操作流程 1 先检查血红蛋白计的测定管和吸血管是否清洁。 2 将2%冰醋酸加入测定管中至刻度“2”。 3 用酒精棉球消毒采血部位,以采血针采血,用吸血管插入流出的血滴深处,吸血至刻度20ul处,拭净外壁,将血液立即吹入测定管的冰醋酸中。反复吸吹,使吸血管中血液全部进入冰醋酸液中(避免起气泡)。徐徐吹入沙利氏比色管内,不要产生气泡,再反复吸、吹数次,以洗出沙利氏吸血管中的血液。 4 静置10min,待血液变成褐色后,缓缓滴加蒸馏水,每加1滴,用细玻璃棒搅动一次,直到颜色与标准色柱完全相同为止。 5 液柱凹面所指的刻度数,即为每百毫升血液中血红蛋白的克数,用g/ml表示 注意事项 1 吸血量要准确,吸血管中的血不应混有气泡,管外沾附的血液要擦去。 2 血液加冰醋酸后,要求放置的时间不应少于10min,否则会使测定结果偏低。
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