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利用基因芯片研究HBV 引起的急性 肝功能衰竭过程中肝再生的机制 November 2012 背景介绍 据统计病毒性肝炎和乙肝病毒携带者在我国人群当中有14%以上人口感 染。 病毒性肝炎是由多种肝炎病毒引起的以肝脏病变为主的一种传染病。 目前的病原学分型为：有甲、乙、丙、丁、戊五种肝炎病毒，分别写作HAV、 HBV、HCV、HDV、HEV。 乙型肝炎病毒（HBV, Hepatitis B virus) 属于嗜肝DNA病毒科，基因 组长约3.2kb ，为部分双链环状DNA。 特点： (1)乙肝病毒(HBV)具有顽强的抵抗力； (2)HBV有明显的嗜肝性； (3)HBV的严格种属特性：HBV主要是侵犯人类和 其他灵长类动物； (4) HBV本身对肝脏的非致病性; (5)HBV的致癌性, HBV是致肝癌的重要因子， 约80%—90%的肝癌都有HBV背景。 背景介绍 急性肝功能衰竭 （ALF, Acute Liver Failure)是原来无肝病者肝 脏受损后短时间内发生的严重临床综合征，死亡率高。最常见的病因是 病毒性肝炎。原位肝移植是目前最有效的治疗方法。 大部分肝切除 （partial hepatectomy,PH）或肝损伤后，肝细胞 数量急剧减少，各种反馈信号刺激肝干细胞/肝祖细胞进行增殖，通过 细胞增殖由基本不生长状态转变为快速生长状态,以补偿丢失、损伤的 肝组织和恢复肝脏的生理功能。这个过程称为肝再生（liver regeneration，LR）。 肝脏纤维化是一个病理生理过程，是指由各种致病因子所致肝内 结缔组织异常增生。 研究目的 • 本文研究使用的病例是HBV （Hepatitis B virus)引起的ALF(急性肝 功能衰竭)，治疗方法是进行了原位肝移植。通过对ALF样本和正常样 本的基因检测，来探索肝再生功能的分子作用机制。 试验设计 ALF 样本 4例(17个） 正常 样本 10例 无监督分类 差异比较 差异基因功能分析 样本收集 急性肝功能衰竭病例4例，两男两女，平均年龄42岁，之前均无静脉注 射毒瘾，酗酒和纹身。4个病例都是突然出现以下所有或部分症状包括发 烧，腹部疼痛，恶心呕吐和越来越强的不适感，在入院的时候都是有黄疸。 经过检查发现均无慢性肝病。4个病例的临床表现，生化指标和病毒因素 都非常相似。 另外，4个病人也都进行了血清测试，排查HAV ，HCV ，HDV ，巨细胞病 毒（CMV ），EB病毒和HIV ，经测试均为阴性。 4例病人样本的收集是在进行肝移植手术过程中，每个病人取4个样本（其 中病人219取5个样本），一共17个肝组织样本。 样本准备 肝炎病毒标志检测 • 乙型肝炎 ①HBsAg与抗-HBs：HBsAg阳性示HBV 目前处于感染阶段，抗-HBs为免疫保 护性抗体阳性示已产生对HBV的免疫力。②HBeAg与抗-HBe：HBeAg阳性为HBV活跃复 制及传染性强的指标，被检血清从HBeAg阳性转变为抗-HBe阳性表示疾病有缓解感染 性减弱。③HBcAg与抗-HBc：HBcAg阳性提示存在完整的HBV颗粒直接反应，抗-HBc为 HBV感染的标志，抗-HBc IgM阳性提示处于感染早期，体内有病毒复制。 • 丙型肝炎，血清HCV-RNA阳性示病毒活跃复制具有传染性。 • 丁型肝炎 HDV为缺陷病毒，依赖HBsAg才能复制，可表现为HDV-HBV同时感染。 样本收集 正常人样本10例，5男5女，平均