鹿茸多肽诱导心肌干细胞向心肌细胞分化的机制研究δ-中国药房.pdfVIP

鹿茸多肽诱导心肌干细胞向心肌细胞分化的机制研究Δ 1＊ 2 1 1 2 2# 王艳玲 ，黄晓巍 ，李 哲 ，何 璐 ，徐 岩 ，曲晓波 （1.吉林大学基础医学院，长春 130021；2.长春中医药 大学药学院，长春 130117） + 中图分类号 R361.3 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2016）34-4780-04 DOI 10.6039/j.issn. 1001-0408.2016.34.09 摘 要 目的：探讨鹿茸多肽诱导心肌干细胞（CSCs ）向心肌细胞分化的机制。方法：从SD 大鼠体内分离CSCs ，鉴定后培养传代 至P3代后，分为空白对照组、5-氮胞苷诱导组（3μmol/L ）、鹿茸多肽诱导组（800μg/ml ）及其联合诱导组，除空白对照组细胞只加含 3％胎牛血清的培养液外，其余各组细胞加入含相应诱导剂的培养液，培养14d。采用免疫组化法检测细胞表面心肌肌钙蛋白T （cTnT ）表达，免疫印迹技术检测细胞cTnT、活化复制因子2（ATF-2）和肌细胞增强因子2C（MEF-2C ）表达，实时定量聚合酶链式反 应技术检测细胞cTnT 和转录因子Nkx2.5、GATA4mRNA 表达。结果：成功制得CSCs ，纯度＞97％。与空白对照组（cTnT 呈阴性） 比较，各诱导组细胞cTnT 呈阳性，cTnT、ATF-2、MEF-2C 蛋白表达和cTnT、Nkx2.5、GATA4mRNA 表达均增强（P ＜0.05）。与5-氮 胞苷诱导组比较，鹿茸多肽诱导组细胞cTnT、MEF-2C 蛋白表达和cTnT、GATA4mRNA 表达均增强（P ＜0.05），联合诱导组细胞 cTnT、ATF-2、MEF-2C 蛋白表达和cTnT、GATA4mRNA 表达均增强（P ＜0.05）。结论：鹿茸多肽可能通过增强Nkx2.5、GATA4、 ATF-2、MEF-2C 等转录因子的表达来诱导CSCs 向心肌细胞分化。 关键词 鹿茸多肽；心肌干细胞；心肌细胞；分化 Study on the Mechanism of Differentiation from Cardiac Stem Cells into Cardiac Cells Induced by Cornu Corvi Polypeptides 1 2 1 1 2 2 WANG Yanling ，HUANG Xiaowei ，LI Zhe ，HE Lu ，XU Yan ，QU Xiaobo （1.Basic Medical College ，Jilin Uni- versity ，Changchun 130021，China ；2.School of Pharmacy ，Changchun University of TCM ，Changchun 130117，China ） ABSTRACT OBJECTIVE ：To explore the mechanism of differentiation from cardiac stem cells （CSCs ）into cardiac cells in- duced by Cornu Corvi polypeptides. METHODS ：CSCs were isolated from SD rats ，and cultured to P3 generation after identifica- tion and then divided into blank control group ，5-azacitidine induction group （3 μmol/L ），Cornu Corvi polypeptides induction group （800 μg/ml ）and combination induction group. Except blank control group was cultured with culture solution containing 3％ FBS ，other groups wer