细胞培养专用《一步法恒温支原体检测试剂盒》（溶液型）.PDF

细胞培养专用 《一步法恒温支原体检测试剂盒》 （溶液型） 使用说明书 (版本180130) 货号 MD001 储存条件 该产品随冰袋运输，收到产品后请立即放-20 ℃冰箱保存，该条件下，至少2 年内仍然有活性。 产品用途 《一步恒温法支原体检测试剂盒》主要用于检测细胞培养液或别的液体样品 （如血清等）中是否含有支原 体。本产品仅用于基础研究。 产品简介 哺乳动物细胞的培养，支原体 （Mycoplasma ）污染是个世界性的问题。支原体污染几乎可以改变细胞的所 有参数，导致实验结果的不准确、甚至完全错误 （支原体污染对细胞的详细危害，请参考本公司的网站： ）。从2013 年开始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及细胞培养都要进行支原 体检测。相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。 培养法是相对可靠的支原体检测技术，但是该方法非常耗时的，需要数周，不适合作为细胞培养液中支原 体污染的快速检测。此外，通过固体培养法无法检测污染细胞的一种最常见的支原体，即猪鼻支原体 （M.Hyorhinis ）。这是因为猪鼻支原体无法在支原体固体培养基上形成可见的菌落。而猪鼻支原体约占所有支 原体污染的20-50%。 有的实验室使用荧光染色法检测支原体，但是该方法灵敏度太低，而且严重依赖实验人员的经验，实验的 稳定性极差。此外，当该方法检测成阳性时，细胞经常已经严重污染。 目前，细胞培养液中支原体污染的检测通常使用的是PCR 法。但是PCR 法也有明显的缺点：（1）整个过 程大约需要 3 个小时；（2 ）由于细胞培养数天后，培养液中经常含有严重抑制PCR 扩增的代谢物，所以样品 的前处理一般是PCR 法不可或缺的环节；（3）PCR 法的灵敏度有限，通常需要将培养液离心浓缩或者抽提DNA 后再检测；（4 ）PCR 产物的电泳，需要用到EB 等潜在的致癌物质；（5）需要用到PCR 仪、电泳槽、凝胶成 像仪、离心机等仪器。 《一步法恒温支原体检测试剂盒》使用独特的恒温基因扩增技术，彻底解决了上述 PCR 法的缺点：（1） 整个检测过程只需 1 小时，大大缩短了检测时间；（2 ）细胞培养液中的PCR 抑制剂，不会抑制该产品的恒温 基因扩增，所以任何情况下都无需样品的前处理；（3）恒温基因扩增的灵敏度是 PCR 法的 10-1000 倍，检测 只需使用 1 μL 的细胞培养液，无需样品的离心浓缩或者进行支原体DNA 的抽提；（4 ）恒温基因扩增的产物无 需电泳，可以通过指示剂的颜色变化直接肉眼判断反应结果；（5）无需用到PCR 仪、电泳槽、凝胶成像仪、 离心机等仪器，整个检测过程只需一个水浴锅。 经测试，本试剂盒至少可以检测以下13 种支原体：（1）M.Hyorhinis 、（2 ）M.Fermentans 、（3）M.Arginini 、 （4 ）M. hominis 、（5）M. orale 、（6）M. salivarium 、（7）M.pirum 、（8）Acholeplasma Laidlawii、（9）M. agalactiae 、 （10）M.bovis 、 （11）M. buccale 、 （12）M. arthritidis 、 （13）M. pulmonis （注：M. 为Mycoplasma 的缩写）。 其中，前8 种为是最常见的污染细胞的支原体种类，约占污染细胞的支原体的98%左右。以上13 种约占污染细 胞的支原体种类的99%左右。 注意：本试剂盒无法检测Ureaplasma Urealyticum 支原体 （注：该支原体污染细胞的概率极低）！ 如果您想得到 100%正确的支原体检测结果（比如，开展细胞治疗的客户，进行干细胞培养的客户，生产 血清、胰酶、培养液的客户，出售各种原代培养细胞系和肿瘤细胞系的客户等），任选本公司生产的《一步法 恒温支原体检测试剂盒》、《PCR 法支原体检测试剂盒》和《发光法支原体检测试剂盒》中的两种进行检测， 将会得到比较满意的结果，检测的正确率应该在 99.9% 以上。如果同时使用这三种试剂盒进行检测，检测的正 确率应该在99.99% 以上。 上海易色医疗科技有限公司() 电话：021邮箱：yisemed@163.com QQ：2743752129 试剂盒组成 （1）溶液1：1150 μL （50 次检测）； （2 ）溶液2 ：50 μ