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[农学]天蚕素抗菌肽在水产养殖中的应用
天蚕素抗菌肽在水产养殖中的应用 黄沧海 博士 集美大学 内 容 抗菌肽 抗菌肽在水产上的研究与应用 天蚕素抗菌肽-水产饲料添加剂 天蚕素抗菌肽-水产药物 抗菌肽 天蚕素、蜜蜂肽、马盖宁、鲎素等 在诱导条件下,动物免疫防御系统产生的一类对抗外源性病原体致病作用的防御性肽类活性物质 分子量小,稳定性好,水溶性好,抗菌机理独特,对高等动物正常细胞无害 双亲结构,阳离子型 具有较强的广谱抗菌能力,对革兰氏阳性菌及阴性菌均有杀伤作用,对真菌、寄生虫、病毒、肿瘤细胞也有一定的抑杀作用 抗菌肽与肽类抗生素… 第一代糖肽类抗生素:万古霉素、替考拉宁、去甲万古霉素 第二代糖肽类抗生素:Dalbavancin、Oritavancin、Telavancin 环脂肽类抗生素:多粘菌素、杆菌肽、达托霉素 抗菌肽种类多、来源多、抗菌谱广 抗菌肽与肽类抗生素… 抗生素主要是细菌、真菌或放线菌发酵的产物,由酶促反应合成;抗菌肽是生物基因编码在核糖体上合成 抗生素含非蛋白质氨基酸(D-氨基酸),多为锁环状肽链;抗菌肽都是L-氨基酸,含有双亲α-螺旋或β-折叠结构的带正电荷的线性肽链,不含其他附加基团 …抗菌肽与肽类抗生素 糖肽类抗生素抑制细胞壁的合成;抗菌肽通过与带负电荷的微生物细胞膜直接作用,改变其通透性,造成膜的物理性损伤,导致细胞内容物外渗而死亡 抗生素发挥作用要通过微生物细胞膜上或胞内特异的受体,且受体类型有限,微生物容易通过变异产生耐药性;抗菌肽是通过阴阳离子的物理作用,可以很快杀灭微生物而不产生耐药性 抗菌肽的抑菌作用机理 离子通道模型 可变毯模型 抑制细胞壁形成 抑制细胞呼吸 诱导细胞凋亡 攻击线粒体 影响细胞染色体 断裂癌细胞骨架系统 抗菌肽的抗菌机制应该有多种 抗菌肽的作用模式图 抗菌肽的抗病毒作用机理 天蚕素能直接与病毒外壳作用,导致病毒外壳的通透性增加 裂解病毒颗粒 阻断病毒与细胞融合 抑制病毒复制 抗菌肽的作用特点 抗菌肽作用于细菌的细胞膜,使其通透性增大,从而杀灭细菌。细菌必需改变膜的结构才能防御抗菌肽的进攻,改变膜的结构意味着要改变多个基因 只对原核生物细胞和病变真核生物细胞有抑制作用,真核生物细胞膜含有大量的胆固醇,使膜结构趋于稳定,高等动物细胞存在高度发达的细胞骨架系统 抗菌肽在水产上的研究 1、1988年Nakamura T等首次对海洋生物亚洲鲎提取纯化,获得鲎肽素,低浓度能抑制革兰氏阴性和阳性细菌的生长。 2、Azumi K等(1990)从一种海鞘的血细胞中分离获得抗菌肽Haloyaminen,并试验发现其可抑制某些鱼RNA病毒和某些海水细菌的生长 。 抗菌肽在水产上的研究 3、1997年Destoumieux等从养殖南美白对虾血细胞和血浆中分离到了几种抗菌活性因子,其中3种具有抗真菌、细菌尤其是革兰氏阳性菌的能力 4、 1996年,以色列学者Oren从豹鳎体内分离得到Pardaxin此肽具有比蜂毒素更强的抗菌活性和更低的人红血球溶血活性 5、Mitta等从两种贻贝中分离到多种抗菌肽 抗菌肽在水产上的研究 黄平等研究了草鱼肠道的抗菌肽 37℃,30分钟,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和嗜水气单胞菌的细胞膜皱缩破裂 胰蛋白酶消化37℃、 16小时,对其结构和抑菌活性无影响 100 ℃,30分钟对其抑菌活性无影响 抗菌肽在水产上的研究 李思明等(2007)从稚鳄龟组织提取的抗菌肽对有效抑制沙门氏菌和嗜水气单胞菌 刘慧明等(2008)研究鲎抗菌肽对隐球菌和枯草芽孢杆菌具有抑制作用,而对变形杆菌无效 1、姜兰等(2002)研究发现,抗菌肽对水产养殖过程中常见病原菌—嗜水气单胞菌、梅氏弧菌、迟钝爱德华氏菌及温和气单胞菌均有较好的抑菌效果 抗菌肽在水产动物的应用 3、王广军等(2005)等在饲料中添加抗菌肽。 结果发现:饲料中添加抗菌肽对南美白对虾的生长有显著影响,平均终末体重比对照组提高了23%,日生长速度提高了58%,相对增重率提高了19%,成活率提高了9%,饲料系数降低了13% 抗菌肽在水产动物的应用 李清等(2004)在草鱼饲料中添加抗菌肽可提高生长速度、存活率,促进矿物元素的吸收和利用 刘福星等(2004)在凡纳滨对虾饲料中添加抗菌肽,生长速度、饲料转化率、成活率和饱满度均提高了 抗菌肽在罗非鱼饲料中的应用 FDA仅批准土霉素和磺胺二甲氧嗪(Ormetoprim)用于水产动物药物添加剂 允许使用的饲料添加剂品种目录 禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录 试验一 CAD对罗非鱼幼鱼生产性能的影响(2000尾,集美大学,2009年,56天) 试验三 抗菌肽对大黄鱼的影响 试验对象:大黄鱼幼鱼(32g) 试验地点 :福建省宁德市某大型养殖场 试验设计:对照组(25%大蒜素,150g/t;三黄粉125g/t
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