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[英语学习]Chapter 5 nucleic acids

O. T. Avery testified the transforming substance was DNA (1944) 证明转化物质是DNA A Hershey and M Chase further testified transforming substance was DNA by infection of bacteria with T2 (1952) 进一步通过噬菌体T2 对细菌感染的试验证明转化物质是DNA §5.3 DNA序列分析 一、DNA限制性内切酶 来源:细菌对侵入的噬菌体的抵抗的研究发现了DNA限制性内切酶。 类型:类型Ⅰ(复杂的多功能酶,既能降解DNA,又能修饰DNA)和类型Ⅱ(简单酶,产生粘性末端或平齐末端)。 限制性内切酶和限制性图谱:限制性片断长度多态性(Restriction fragment longth polymorphisms, RFLP)研究,可用于缺失基因的诊断和DNA指纹鉴定等。 二、目前多采用F. Sanger “链终止法” O HOH2C H H OH 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 核 糖 N N N N H H H H 9 腺嘌呤 ddATP P P P ——CCGGTAGCAATT—— 3′ 5′ 模板 引物 ——GG— 5′ 3′ GGC GGCC GGCCATC C ddCTP GGCCA GGCCATCGTTGA ddATP A GGCCATCG GGCCATCGTTG G ddGTP GGCCAT GGCCATCGT GGCCATCGTT T ddTTP C C A T C G T T G A 5′ 3′ 三、DNA与基因组 DNA Transcription RNA (mRNA、tRNA、rRNA) Translation Protein 基因 基因是DNA片段的核苷酸序列,DNA分子中最小的功能单位。 结构基因 调节基因 基因组 (一)DNA与基因 (二)原核生物基因组的特点 1. DNA大部分为结构基因,每个基因出现频率低。 2. 功能相关基因串联在一起,并转录在同一mRNA中(多顺反子)。 3.有基因重叠现象。 A B C D E F G (三)真核生物基因组的特点 1. 重复序列 单拷贝序列 :在整个DNA中只出现一次或少数几次,主要为编码蛋白质的结构基因。 中度重复序列 :在DNA中可重复几十次到几千次。 高度重复序列 :可重复几百万次 高度重复序列一般富含A-T或G-C,富含A-T的在密度梯度离心时在离心管中形成的区带比主体DNA更靠近管口;富含G-C的更靠近管底,称为卫星DNA(satellite DNA) 富含A-T 富含G-C 主体DNA 2. 有断裂基因 mRNA 1 872bp 内含子(intron):基因中不为多肽编码,不在mRNA中出现。 A B C D E G 7 700bp F 外显子(exons):为多肽编码的基因片段。 :由于基因中内含子的存在。 例外:组蛋白基因(histongene)和干扰素基因(interferon gene)没有内含子。 transcription §5.4 RNA的结构特征 (一)tRNA tRNA约占RNA总量的15%,主要作用是转运氨基酸用于合成蛋白质。 tRNA分子量为4S,1965年Holley 测定AlatRNA一级结构,提出三叶草二级结构模型(四臂四环)。 主要特征:1. 氨基酸臂3′端有CCAOH的共有结构;2. D环上有二氢尿嘧啶(D);3. 反密码环上的反密码子与mRNA相互作用;4. 可变环上的核苷酸数目可以变动;5. TψC环含有T和ψ;6. 含有修饰碱基和不变核苷酸;7. 倒L形的三级结构。 主要特征:1.四臂四环;2.氨基酸臂3′端有CCAOH的共有结构;3.D环上有二氢尿嘧啶(D);4.反密码环上的反密码子与mRNA相互作用;5.可变环上的核苷酸数目可以变动;6.TψC环含有T和ψ;7.含有修饰碱基和不变核苷酸。 (二)rRNA 占细胞RNA总量的80%,与蛋白质(40%)共同组成核糖体。 原 核 生 物 真 核 生 物 核糖体 rRNA 核糖体 rRNA 70S(30S、50S) 16S、5S、23S 80S(40S、60S) 18S、5S、5.8S、28S ? (三)mRNA、hnRNA与snRNA mRNA约占细胞RNA总量的5%,是蛋白质合成的模板。 真核生物mRNA的前体在核内合成,包括整个基因的内含子和外显子的转录产物,形成分子大小极不均匀的hnRNA。 snRNA主要存于细胞核中,占细胞RNA总量的0.1~1%,与蛋白质以RNP(核糖核酸蛋白)的形

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