[高二理化生]221动物细胞培养和核移植技术.pptVIP

①、原代培养：将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 (1)、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） (2)、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、维生素动物血清等。） (3)、温度和PH 温度：36.5+（-）0.5℃, PH：7.2－7.4 (4)、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 动物细胞特点： 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄，这是指整体细胞而言。 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含有保持物种遗传性所需的全套基因，而且并没有因细胞分化而丢失基因，因此高度分化细胞的细胞核仍具有全能性。 本节知识结构 动物细胞培养和核移植技术 3、用动、植物的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A.都要用到CO2培养箱 B.都须用液体培养基 C.都要在无菌条件下进行 D.都可体现细胞的全能性 3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。 此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是核供体动物100%的复制。 P49 讨论 * * 动物细胞培养 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞核移植 动物细胞工程常用技术 　　其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础 一、动物细胞培养 1、动物细胞培养概念 从动物机体中取出相关的 ，将它分散成 ，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞 。 组织 单个细胞 生长和增殖 动物胚胎或 幼龄动物的组织、器官 细胞生命力旺盛，分裂能力强 使细胞和培养液充分接触 原理：细胞增殖 . 为什么要把组织剪碎、用酶分解开？ 用什么酶？为什么？用胃蛋白酶行不行？ 胰蛋白酶会不会把细胞消化掉？ 为什么要再分装？ 什么是原代培养、传代培养？ 培养得到的细胞，如果暂时不用时，怎么保存？ 试说动物细胞培养的大致过程。 2、动物细胞培养的过程 请同学阅读P44－P46思考下列问题 胚胎或幼龄动物的组织器官 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 剪碎 胰蛋白酶 原代培养 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 比老龄动物的组织细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛。分化程度越低，增殖能力越强，越容易培养。 动物细胞培养不能最终培养成生物体 细胞增殖缓慢，核型可能变化 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 贴壁生长 接触抑制 10代以内，保持正常二倍体核型 传代培养 2、动物细胞培养的过程 无限传代 细胞株 细胞系 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。 1.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 寻根问底 ①、细胞株：传代培养的细胞一般能传到10－50代，遗传物质没有发生改变。 ②细胞系：传代培养的细胞传到50代后，有部分细胞的遗传物质发生改变，并且具有癌变的特点，能无限地传代下去。 ③细胞株和细胞系的区别：细胞株的遗传物质未改变，存在接触抑制。一般传至10代后就不易传。细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，无限增殖。 3、动物细胞培养的基本概念 （1）细胞株与细胞系 （2）原代培养与传代培养 3、动物细胞培养的基本概念 ②传代培养：贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，称为传代培养。 （3）接触抑制 3、动物细胞培养的基本概念 细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞停止分裂增殖，数量不再增加。 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 细胞固定在瓶壁上生长和分裂。 随细胞增多，细胞就 会停止分裂增殖 遗传物质改变 传至10代后不 易传下去 贴壁生长细胞分裂生长到相互接触时就停止分裂增殖的现象叫接触抑制。 4、