免疫沉淀IP技术指引和实验方案-ThermoFisherScientific.PDFVIP

下载本文档

246
0
约4.21万字
约 12页
2018-02-16 发布于天津
举报
版权申诉

免疫沉淀IP技术指引和实验方案-ThermoFisherScientific.PDF

1、本文档共12页，可阅读全部内容。
2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

免疫沉淀IP技术指引和实验方案-ThermoFisherScientific

技术指南#64 免疫沉淀 (IP) 技术指南和实验方案 TR0064.0 目录简介 1 IP、Co-IP 和Pull Down 实验的通用介绍 2 A. 免疫沉淀 (IP) 2 B. 免疫共沉淀 (Co-IP) 2 C. Pull-Down 实验 2 影响免疫沉淀的因素 3 A. 方法类型 3 B. 支持物类型 3 抗体固相化和 C. (IP Co-IP) 4 D. 诱饵蛋白固相化 (Pull-Down) 6 E. 加样顺序 7 样本预纯化和对照 F. ( ) 7 G. 结合缓冲液 7 H. 洗涤缓冲液 8 I. 洗脱缓冲液. 8 常见问题和原因 9 A. 纯化所得抗原量低 9 B. 纯化所得抗原纯度低 9 通用免疫沉淀实验流程 10 免疫沉淀实验方案的调整 11 Thermo Scientific Pierce IP 、Co-IP 和Pull-Down 试剂盒 12 简介免疫沉淀和免疫共沉淀是利用固定在固相支持物上的抗体从复杂的混合物中富集或纯化特定蛋白质 (IP) (Co-IP) ，，或蛋白质组的方法是许多蛋白质组工作流程中的重要步骤用于研究蛋白质的存在分子量大小相对丰度。IP ，、、、丰度的上调或下调蛋白稳定性翻译后修饰及相互作用等利用获得的纯化抗原可采用多种技术进行分析如、、。 IP ，和等分离所得的蛋白还可以在酶切后通过质谱进行鉴定或定量分析 ELISA Western Blotting 。，。最早的免疫沉淀方法是将放射性前体如氨基酸加入细胞培养基中使得细胞在生长的过程中总蛋白可以直接， ( ) ，，被标记裂解细胞后利用固定在微珠支持物上的特异抗体从蛋白混合物中纯化获得抗原纯化所得抗原用。，，。 SDS- 分离后再通过放射自显影将凝胶上的放射性信号显示到胶片上 PAGE ，，。这种放射性免疫检测方法仍在使用但有关放射性材料使用的安全性监管和成本问题促进了非同位素方法的开