蛋白质微球载入壳CS—PCL支架后的.pptVIP

在上述方程中，当n＝0.5时，药物释放为控制扩散机制；当n=1.0时，药物释放为二类运输或零级释放动力学，而当n为0.5~1.0的时候，则为两种机制的复合，这种机制就是反常运输机制。从上表中我们可以明显的看出本实验中TGF—β1的释放机制就是反常运输机制。 通过一系列的实验，我们得出：TGF—β1微球装载入CS—PCL支架后，不仅能够维持复合物所需要的压力强度，而且能够作为载体运输TGF—β1，使TGF—β1的释放达到较理想的状态：没有初始爆发现象，释放速率接近线性，释放时间持续时间长。因此， TGF—β1微球装载入CS—PCL支架在关节软骨的治疗中有很好的应用前景。 四、实验总结： 谢谢！ 蛋白质微球载入壳聚糖—聚己内酯（CS—PCL）支架后的控制释放研究 生医0804班 万飞 1、背景介绍 2、实验过程 3、实验结果及讨论 4、实验总结 蛋白质微球载入CS—PCL支架后的控制释放研究 1、关节软骨的作用： ①承受力学负荷人的一生中社会活动都离不开关节软骨的正常功能。关节软骨能将作用力均匀分布，使承重面扩大。这样，不但能最大限度地承受力学负荷，还能保护关节软骨不易损伤。 ②润滑作用关节软骨非常光滑，关节运动时不易磨损，并且，活动灵活、自如。关节软骨能维持人——生的活动而不损伤就是因为有良好的润滑作用。在关节滑膜有病变时，如类风湿性关节炎等，滑液分泌异常，失去正常的润滑作用，影响关节功能及关节软骨的营养。 ③力的吸收人在一生中从事很多剧烈活动而不损伤关节，原因之一就是关节软骨有力的吸收作用。 由此可见，维持关节软骨的正常结构对我们的正常生活有着重要的作用。 一、背景介绍： 由于运动损伤和其他关节创伤，导致关节软骨经常受损，而关节软骨中细胞较少，有大量的基质，没有血管和神经，所以关节软骨的自然修复很有限。尽管小范围和轻度关节损伤可以通过在基质中维持适当浓度的蛋白质和药物浓度来进行修复，但大范围和重度的关节损伤的修复仍面临着巨大的挑战。 2、关节软骨的受损及修复 作用部位的药物浓度 药物的持续释放时间 影响治疗效果的因素 因此，相关的研究则是主要解决上面两个问题。 相关研究表明：生长因子在合适的支架的帮助下对于关节软骨的下有着明显的效果。其中，转化生长因子—β1（TGF—β1）由于其能促进相关细胞的生长和分化而格外受关注。以下是TGF—β1的相关作用： 促进细胞增殖：TGF-?在琼脂培养中能刺激那些不转化成成纤维细胞的其他细胞成非静态性生长。 调节细胞分化：TGF-?在不同条件下，对成骨细胞及成软骨细胞用促进分化或降低分化的双重作用。 促进细胞外基质的合成：TGF-?可直接刺激成纤维细胞外基质的合成，并对其新合成的基质降解有明显的抑制作用。 免疫调节作用：TGF-?对免疫系统的调节作用是其多种生物学效应之一，研究证实TGF-?是一类有广泛效应的免疫调节剂。 3、TGF—β1 TGF—β1 血液 进入关节软骨 细胞基质 经过运输 促进细胞生长分化 上图可以表示TGF—β1的传输系统，由于TGF—β1是一种蛋白质，所以在体内传输时会被分解或者被抗体消灭，因此需要找到一种合适的载体来运输TGF—β1，使其能达到病灶部位并产生作用。 在各种载体的研究中，合适的支架有很好的前景。支架不仅能够作为蛋白质药物的载体，而且能够促进种子细胞的生长。 但支架的应用还有一些问题需要考虑（1）要达到治疗效果需要相当的蛋白质药物浓度，需要体积较大的支架去运载；（2）由于支架通常有较大的孔径和高的孔隙率，导致释放速率得不到控制，会出现最初爆发现象。 实验思路：为了能够得到持续的可控的释放速度，同时又能够保持TGF—β1的生物活性，最近的研究中， TGF—β1最先是用东尼平作为交联剂，通过乳化法载入壳聚糖微球中，然后再将微球和合适的CS—PCL支架相结合，就得到所期待的药剂。 1、材料准备： 壳聚糖（分子量适中）从Aladdin Inc购买，然后进行脱乙酰化，使其脱乙酰程度达到92.7（±1.8）%；TGF—β1，东尼平，溶菌酶，己内酯等一些材料都买自不同的公司。 2、 TGF—β1载入壳聚糖微球的制备 TGF—β1载入壳聚糖微球是用东尼平作为交联剂通过乳化法合成的。先将壳聚糖（CS）溶入1.0%的乙酸溶液中形成2wt.%的溶液；每份溶液中加入溶解在HCl的TGF—β14mM；然后将不同量的东尼平溶液中逐滴加入上述溶液中，并在37℃均匀搅拌1h。然后经过离心过滤，再用异丙醇和蒸馏水冲洗，最后在﹣75℃冷冻干燥即可得到所需的微球。 二、实验过程 3、蛋白质微球载入CS—PCL支架 CS—PCL支架是通过人工合