[医学]分子生物学——转录.pptVIP

第十一章 RNA的生物合成 Chapter 12 Biosynthesis of RNA 特点 条件 过程 真核生物转录相关概念 顺式作用元件 反式作用因子 真核生物转录后加工和修饰 转录 某段DNA的碱基顺序 - RNA的碱基顺序 转录 transcription 产物 rRNA，tRNA，mRNA，snRNA和HnRNA 细胞中的几乎所有的RNA 特点 不对称性 不连续性和单向性 有特定的起始位点和终止位点 第一节 RNA转录合成的特点 一、不对称性 模板链(有义链) template strand 编码链(反义链) coding strand 默认书写顺序 问题： 为何多数生物均使用双链DNA 若某DNA含X个基因，是否所有基因必须存在于 一 条链上 二、不连续性和单向性 不连续 人类基因组中90－95% 是不转录的 方向 5→3 单顺反子 只含一个基因的遗传信息 多顺反子 （常见于原核） 含多个基因的遗传信息 三、有特定的起始位点和终止位点 转录单位 transcription unit 转录区+调节顺序 原核 —— 操纵子 operon 为什么会有调节顺序即它的用处是什么 标记基因的开始 控制基因的转录频率 操纵子 调控序列 + 结构基因（转录区） 调控序列 启动子 promoter 位于基因上游 RNA聚合酶识别、结合 启动子研究策略 p270 RNA-pol 保护法 原理 核酸外切酶 水解 DNA链 启动子结构特征 －35区 TTGACA -10区 pribnow box TATAAT 共性 富含AT 为什么？ 原核生物中转录起始区的共同序列 条件 底物和模板 RNA聚合酶 终止因子（原核生物） 第二节 RNA转录合成的条件 原核生物 RNA聚合酶（DDRP） 无需引物，方向 5-3 全酶 = 核心酶 + σ 核心酶 = α2ββ’ω σ—— 识别启动子 真核生物 RNA聚合酶（P275） 依α-鹅膏蕈(xun)碱的敏感性分类 amanitin 由10～12个亚基组成，结构复杂，功能不同 酵母RNA聚合酶Ⅰ和Ⅱ 原核生物——终止因子 ρ蛋白：六聚体蛋白质 （46KD） 识别出现在RNA链上的终止信号 结合RNA RNA被释放 五、激活因子 降解产物基因激活蛋白（CAP），又称为cAMP受体蛋白（CRP）。 二聚体蛋白质，23kd 蛋白与cAMP结合后 诱导RNA聚合酶与起始部位结合 起始转录 第三节 过程 一、起始 识别启动子 形成起始复合物 σ因子识别转录起始识别点 －35区 TTGACA序列 形成全酶(覆盖范围 -55,+20) -10区 局部解链 形成第一个磷酸二酯键 ATP或GTP＋NTP 形成 RNA-DNA-酶 三元复合体 二、延长 σ因子从全酶上脱离 核心酶沿DNA链移动，聚合RNA 利福平（利福霉素）抑制beta亚基，阻止延伸 翻译同步进行 三、终止 依赖辅助因子的终止 由终止因子(ρ因子)识别特异的终止信号，并促使RNA的释放。 自动终止 RNA转录产物形成发夹形及寡聚U的二级结构 思考题 复制和转录的异同 p266 真核生物转录 元件 DNA链上的碱基顺序 顺式作用元件 cis-acting element 反式作用元件 trans-acting element 因子 蛋白质 反式作用因子 trans-acting factor cis-acting element 仅对其所处DNA链上的基因表达起调控作用 Hogness盒或TATA盒（启动子） CAAT盒及GC盒等 增强子等 增强子 enhancer 可远离转录起始点 在所调控基因的上下游均可 trans-acting element 能对不在一条DNA链上的结构基因起作用 编码产生调控蛋白 trans-acting factor 转录因子 transcriptional factors, TF 直接或间接结合RNA聚合酶 第四节 真核生物RNA 转录后的加工修饰 一、mRNA的转录后加工 5’端 帽子结构(m7GpppGp） 3’端 多聚腺苷酸尾巴(poly A tail) 剪接 编辑 加尾(adding tail)： 细胞核 核酸外切酶（3-5）修饰 加 polyA mRNA的半寿期 剪接（splicing)和剪切(cleavage) 断裂基因 外显子 内含子 snRNA+多肽 - 小分子核蛋白体 套索状结构