SEC方法开发影响因素-Waters.PDFVIP

™ 利用Auto·Blend Plus 技术简化SEC方法开发流程 沃特世科技(上海)有限公司 郭天 应用工程师 tian_guo@W 1 内容摘要  体积排阻色谱技术(SEC)原理介绍 ™  Auto·Blend Plus 技术介绍 ™  利用Auto·Blend Plus 技术辅助的SEC方法开发过程 • SEC方法开发过程中的考虑因素 • SEC方法开发流程 • SEC系统和色谱柱维护 2 内容摘要  体积排阻色谱技术(SEC)原理介绍 ™  Auto·Blend Plus 技术介绍 ™  利用Auto·Blend Plus 技术辅助的SEC方法开发过程 • SEC方法开发过程中的考虑因素 • SEC方法开发流程 • SEC系统和色谱柱维护 3 SEC技术简介  近50年历史的技术,从淀粉作为固定相到合成树脂,现在常用硅胶基质或杂 化颗粒为固定相  根据 分子在溶液中的大小(Stokes radius 半径）来进行分离 ；通常分子 的大小与分子量相关，故常用分子量来表征分离能力  分离过程是等度过程  分离过程发生在少于1个CV(column volumn)的条件下;故谱带展宽 (band broadening) 在SEC中是重要影响因素  方法开发的影响因素包括：离子强度，流动相添加剂，流动相pH值，流 速，载样量，色谱柱柱长和内径 4 SEC分离过程 5 SEC分离过程 分离过程发生在少于1个CV(column volumn)的条件下 6 影响SEC分离的硬件因素 – 谱带展宽 使用合适的色谱柱和仪器可以减少谱带展宽 HPLC Waters UPLC® Broad Band Technology Broad Peak Narrow Peak Less Sensitivity Increased Sensitivity Less Resolving Power Increased Resolving