[农学]生物化学课件.pptVIP

第三章 酶 3.4 酶促反应动力学(影响酶促反应速度的因素） 二、底物浓度与酶促反应速度的影响 米氏方程的推导 （二）Km值 的物理意义 当反应速度为最大反应速度一半时 小结：Km的物理意义 Km值 ① Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。 ② 意义： a) Km是酶的特征性常数之一； b) Km可近似表示酶对底物的亲和力； c) 同一酶对于不同底物有不同的Km值。 d) Km是代谢物对多种代谢途径选择取向的决定因素之一 e) Km也可反映酶对底物的专一性 （三）Km值与 Vmax值的测定 1、双倒数作图法又称林-贝氏作图法（1934） 1 Km 1 + 1 V Vmax [S] Vmax 三、酶浓度对酶促反应速度的影响 当[S][E]，酶可被底物饱和的情况下，反应速度与酶浓度成正比。 关系式为：V = k2 [E] 四、温度对酶促反应速度的影响 (1)、一方面是温度升高,酶促 反应速度加快。 (2)、另一方面,温度升高,酶的高级结构将发生变化或变 性，导致酶活性降低甚至 丧失。 (3)、因此大多数酶都有一个最适温度。 在最适温度条件下,酶促反应速度最大。 五、 pH对酶促反应速度的影响 七、抑制剂对酶促反应速度的影响 非专一性不可逆抑制 不可逆抑制作用 专一性不可逆抑制 抑制作用 竞争性抑制 可逆抑制作用 非竞争性抑制 反竞争性抑制 (一)可逆抑制作用 定义：抑制剂与酶蛋白以非共价方式结合，引起 酶活性暂时性丧失。抑制剂可以通过透析 等方法被除去，并且能部分或全部恢复酶 的活性。 种类： 1、竞争性可逆抑制 2、非竞争性可逆抑制 3、反竞争性可逆抑制 1、竞争性可逆抑制： ①某些抑制剂的化学结构与底物相似，因而能与底物竟争与酶活性中心结合。 ②竟争性抑制通常可以通过增大底物浓度，即提高底物的竞争能力来消除。 ③动力学：Vmax不变；Km值增加 反竞争性抑制 ①抑制剂只与酶－底物复合物结合； ②抑制程度取决与抑制剂的浓度及底物的浓度； ③动力学特点：Vmax降低，表观Km降低。 反竞争性抑制 小结：各种可逆性抑制作用的比较  (二)不可逆抑制作用 抑制剂与酶反应中心的活性基团以共价形式结合引起酶的永久性失活。如有机磷毒剂二异丙基氟磷酸酯。 ①非专一性不可逆抑制作用： 定义：这类抑制剂可作用于酶分子上的不同基团或几类不同的酶。 例：烷化剂（碘乙酸）：氨基、巯基、咪唑基等 ②专一性不可逆抑制作用 定义：一种抑制剂只作用于一种酶分子中的一种基团。 例：有机磷杀虫剂：乙酰胆碱酯酶 3.4 酶促反应动力学(影响酶促反应速度的因素） 1、酶促反应速度的表示方法 2、底物浓度与酶促反应速度的影响 3、酶浓度对酶促反应速度的影响 4、温度对酶促反应速度的影响 5、pH对酶促反应速度的影响 6、激活剂对酶促反应速度的影响 7、抑制剂对酶促反应速度的影响 3.5 调节酶类 别构酶 同工酶 共价修饰调节酶 酶原激活 一、别(变)构酶 别(变)构调节：体内一些代谢物可与某些酶分子活性中心外的部位可逆结合，使酶构象改变从而改变酶的活性。 别(变)构酶 别(变)剂 二、同工酶 同工酶：催化的化学反应相同，但酶蛋白的分子结构、理化性质不同的一组酶。 人体心,肝和骨骼肌LDH同工酶谱 组织器官 LDH1 LDH2 LDH3 LDH4 LDH5 （ 占总 LDH活性的百分比） 心 35~70 28~45 2~16 0~6