[高二理化生]11 DNA重组技术的基本工具.pptVIP

日前，在华南农业大学与植保（中国）协会在广州联合召开的?“农业生物技术保障粮食安全”的研讨会上，国内唯一申报转基因木瓜种植项目的负责人、华南农业大学李华平教授告诉记者：“目前广东市面上九成多木瓜为安全的转基因木瓜！” 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所研究员杨晓光教授进一步指出，与传统食品相比，生物技术作物及其产品在微生物毒素、农药残留方面更加安全，能为消费者带来更营养、更健康的食品选择，比如转基因抗虫水稻，从某种意义上说，它的安全性甚至超过了传统产品。因为转基因抗虫水稻减少了化学农药的用量，从而降低了产品中农药的残留量。 二、基因工程的基本工具 限制酶所识别的序列有什么特点？ 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的，我们称这个序列为回文序列。 阅读思考 限制酶切割后有两种不同的结果，一种产生黏性末端，一种产生平末端。那么恢复它们的连接时，所用DNA连接酶是否可以不加选择？ 使用限制性内切酶时，需同时使用解旋酶吗？使用DNA连接酶时，需同时使用DNA聚合酶吗？ DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？ 形成子代DNA分子 用于基因工程 用途 合成新的DNA分子 将DNA双链上的两个缺口同时连接起来 作用结果 以一条DNA链为模板，将单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链 在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 作用过程 单链 双链 连接DNA链的方式 需要 不需要 模板 催化相邻二个核苷酸形成磷酸二酯键 作用实质 DNA聚合酶 DNA连接酶 迄今为止，所发现的DNA连接酶都不具有连接单链DNA的能力，至于原因，现在还不清楚，也许将来会发现可以连接单链DNA的酶。 DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？ 1。切割DNA时，用限制性内切酶打开磷酸二酯键，此过程在加热条件下（常用37℃）下进行，（氢键的键能很小）两个切点之间的氢键不用解旋酶便会自动断开（其它部位的氢键不会打开，因为其它部位仍有磷酸二酯键这种相当于连接骨架的键的支持）。这样就获得了黏性末端。所以不需要解旋酶。 2。在重组DNA时，可用DNA连接酶的连接磷酸二酯键，至于氢键，它们会通过碱基互补，自动形成。不需消耗能量，不需DNA聚合酶。 作用： 具备的条件 种类： 将外源基因送入受体细胞。 能在宿主细胞内复制并稳定地保存 具有多个限制酶切点 具有某些标记基因 质粒、噬菌体和动植物病毒。 使用运载体的目的 用它作为运载工具，将目的基因送到宿主细胞中去。 （三） 运载体——“分子运输车” 质粒的特点 （１）质粒上会存在某些标记基因，标记基因有什么用途？ （２）要想将某个特定基因与质粒相连，需要用几种限制性内切酶和几种DNA连接酶处理？ 思考 质粒：是一种 的、 、 ，并具有 能力的 。 裸露 结构简单 独立于细菌染色体（拟核）之外 自我复制 双链环状DNA分子 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因的存在，将来可用含青霉素的培养基鉴别。 目的基因插入位点 氨苄青霉素抗性基因 复制原点 质粒 大肠杆菌细胞 DNA 限制酶切割位点，插入目的基因 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有标记基因的存在，将来可用含青霉素的培养基鉴别质粒是否有导入细胞 ---TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG--- ---ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC--- —————————————————— —————————————————— ---AGGATCTTAAGAGAGCCATACTTAAGGTATG--- ---TCCTAGAATT CTCTCGGTATGAATTCCATAC--- ——————---———————————— ——————---———————————— 判断：下列二个DNA分子（片段），哪一个是目的基因，哪一个是运载体？ 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 B * * 遭到玉米螟侵害和真菌感染的普通玉米(左)与转基因玉米(右) 在百度输入“转基因”，找到相关结果约26,300,000。输入“基因工程”，找到相