棉铃虫6龄幼虫中肠与脂肪体微粒体P450酶系的比较CURRENT.PDF

动物学报 　48 (2) :208～212 , 2002 A cta Zoologica S inica 　　　　　 　 棉铃虫 6 龄幼虫中肠与脂肪体 微粒体 P450 酶系的比较 邱星辉　李　薇　冷欣夫 　　 ( 中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室, 北京 100080) 摘　要 　报道了棉铃虫 6 龄幼虫中肠和脂肪体微粒体 P450 酶系的组成与加单氧酶活性。与脂肪体微粒体相比 , 中肠微粒体具有更高的细胞色素 P450 、细胞色素b5 和 NADPH - 细胞色素 P450 还原酶含量 , 表现出较高的艾氏 剂环氧化酶和对 - 硝基苯甲醚 O - 脱甲基酶活性。SDSPA GE 电泳显示, 中肠与脂肪体微粒体介于 P450 分子量 ( ) 范围内 45～60 kDa 的蛋白图谱有所不同 , 反映出中肠和脂肪体微粒体蛋白组成存在差异。通过对 - 硝基苯 甲醚O - 脱甲基酶的动力学分析发现脂肪体微粒体的对 - 硝基苯甲醚 O - 脱甲基酶对底物有更强的亲和性 , 表明 不同组织来源的 P450 同功酶存在质的不同。 关键词 　棉铃虫 　中肠 　脂肪体 　细胞色素 P450 　加单氧酶 　　细胞色素 P450 加单氧酶系 ( 以下简称 P450 体均占绝对优势 (Qiu et al . , 2000) 。本文就中肠 酶系) 是广泛存在于生物体的一类代谢酶系 , 因其 和脂肪体微粒体 P450 酶系的特征做一更全面深入 生物学重要性 , 一直是生物学研究的一个重要对象 地探讨。 ( ) ( Wong , 1998 。它的作用包括对内源性物质 激 1 　材料与方法 素、脂肪酸等) 的代谢 , 以及对外源性的植物次生 物质、农药、药物以及环境污染物等天然和人工合 11 　化学试剂 成物质的代谢 ( Wong , 1998 ) 。昆虫细胞色素 NADPH , NADH ( 98 %) , D TT ( 1 , 4 - 二 P450 酶系不仅参与保幼激素、蜕皮激素及其类似 硫代苏糖醇 , 97 %) 为 B. M. 产品 ; Tris 、BSA 、 物的代谢 , 而且还在昆虫对杀虫剂以及植物毒素的 ED TA 和电泳标志蛋白购自 Sigma 公司 ; SDS 和丙 解毒中发挥重要作用 ( Feyereisen , 1999) 。 烯酰胺为 Merck Darm Stadt 公司出品 ; 考马斯亮 棉铃虫是重要的经济害虫 , 它的大发生已造成 兰 G250 为 Fluka 公司提供 ; 过硫酸铵购于 Bio 巨大的经济损失。棉铃虫防治失败的一个主要原因 Rad 公 司 ; TEMED 为 KochLight 公 司 产 品 ; 是其产生了抗药性 (Dong et al . , 1999) 。近年来 PMSF ( 苯甲基磺酰氟) 为 Serva 产品 , Aldrin , 的研究结果表明 , P450 酶系活性的增强是昆虫抗 Dieldrin ( 99 %) 为 RiedelDehaenagseelze ( ) ( ) 药性的主