03第三章-病毒的复制.pptVIP

第三章 病毒的复制 第一节 病毒复制概论 病毒属于微生物界，其不同于其他微生物的特性包括： 病毒一般只含有一种核酸——DNA或RNA; 病毒通过基因组复制和表达，产生子代病毒的核酸和蛋白，随后装配成完整的病毒粒子； 病毒缺乏完整的酶系统和能量系统； 某些RNA病毒(反转录病毒)的RNA经反转录合成互补DNA (cDNA)，随细胞DNA的复制而增殖； 病毒没有细胞壁，也不进行蛋白质、糖和脂类的代谢活动。 一、病毒复制与复制周期 动物病毒―动物细胞培养系统 植物病毒―原生质体培养系统 一、吸附 二、侵入 (二)胞吞作用 (二)胞吞作用 (三)直接进入 四、病毒生物大分子的合成 (一)转录和翻译 单链DNA病毒 双链RNA病毒 负义单链RNA病毒 逆转录病毒 双链环状DNA病毒 核衣壳的装配-二十面体对称 核衣壳的装配-螺旋对称 病毒粒子包膜的获得 (一)流产感染 流产感染是指病毒虽然可以进入细胞，但不能完成复制的感染过程。这是一类普遍发生的非增殖性感染。 依赖于细胞的流产感染:被病毒感染的并能在其中完成复制循环的细胞称为允许细胞，反之则称为非允许细胞(non-Permissive cell)。 依赖于病毒的流产感染:这类流产感染系由基因组不完整的缺损病毒(defective virus)感染引起。 (二)限制性感染 二、缺损病毒 (一)干扰缺损病毒颗粒 干扰缺损颗粒的特征 缺陷性——指DI病毒在必需基因有损伤。对于大多数DI颗粒而言，这些突变体是缺失突变，但也有的是点突变，ts突变体可看作是条件性缺陷。 干扰性——指DI颗粒干扰标准辅助病毒或其它同源病毒的生长。 富集性——指DI颗粒能耗费标准病毒而富集自己。 A 40S ribosomal subunit and eIFs bind at an internal ribosome entry site (IRES) upstream of the ORF。先由细胞核中的DNA转录rRNA通过核孔排出到细胞质，然后由核糖体和rRNA结合，然后细胞质内的tRNA与相应的氨基酸结合，然后tRNA与rRNA配对将对应的氨基酸带到核糖体处由核糖体中的酶进行加工，然后tRNA脱离，氨基酸已经连在肽链上了，肽链合成完毕之后再被送往内质网进行加工就形成了蛋白质。 病毒mRNAs 从核内转移到细胞质中，而且有些翻译的病毒蛋白也可能转运到细胞的任何位置（包括细胞核），糖基化作用（将一些寡糖或低聚糖连接到多肽链上，如果是连在丝氨酸或苏氨酸的–OH group 称为 O-glycosylation;若是连在天冬酰胺的 –NH2 基团上则称为 N-glycosylation（糖蛋白包膜或刺突的成分），酰基化作用（myristyl 十四烷基，豆蔻基 ，十四烷基基团连接到蛋白质的N端的甘氨酸残基上，此过程一般由宿主细胞N-myristyltransferase完成，参与包膜的形成），磷酸化作用是指在激酶的作用下从核苷酸上转移一个磷酸基团到丝氨酸苏氨酸或酪氨酸残基的O of an–OH group，磷酸化作用能改变蛋白质的构型、活性、定位及稳定性。磷酸化(以便与核酸结合)、脂肪酸酰化(以便膜插入) HIV-1 Rev protein的核定位信号R（精氨酸）残基多，核输出信号中L亮氨酸残基多。centrosome 中心体 大肠杆菌的RNA聚合酶是一个全酶由2个α 亚基, β, β‘和一个调控蛋白 (σ) sigma因子组成.， σ因子决定不同的启动子σ70 、 σ54.。典型的原核mRNAs 是 多顺反子的，一个mRNA可能有几个ORFs 。原核生物或病毒mRNAs没有5端的帽子结构和很少有3端的polyA。原核生物的RNA聚合酶分子量很大，通常由5个亚基组成；两个α亚基，β，β′和σ，可写作α2ββ′σ。 甲基化的鸟苷三磷酸通过5–5 磷酸键连接到第一个核苷酸上。　mRNA前体的后加工包括以下四方面：①装上5′端帽子：转录产物的5′端通常要装上甲基化的帽子；有的转录产物5′端有多余的顺序，则需切除后再装上帽子。②装上3′端多聚A尾巴：转录产物的3′端通常由多聚A聚合酶催化加上一段多聚A，多聚A尾巴的平均长度在20～200个核苷酸；有的转录产物的3′端有多余顺序，则需切除后再加上尾巴。装5′端帽子和3′端尾巴均可能在剪接之前就已完成。③剪接：将mRNA前体上的居间顺序切除，再将被隔开的蛋白质编码区连接起来。剪接过程是由细胞核小分子RNA（如U1RNA）参与完成的，被切除的居间顺序形成套索形（即lariat RNA中间体）。④修饰：mRNA分子内的某些部位常存在N6-甲基腺苷，它是由甲基化酶催化产生的，也是在转录后加工时修饰的。 Baltim