不同类型的缺氧对小鼠的影响观察.pptVIP

其余观察指标与处理方法同乏氧性缺氧，也就是每隔5分钟重复观察小鼠的呼吸变化和全身情况，直到动物死亡，记录其存活时间，小鼠死亡后，用含0.1mL肝素生理盐水的注射器从心脏抽取0.2～0.3mL血液并混匀，保留注射器以及小鼠。 接下来取体重一致的1对小鼠用于亚硝酸钠中毒实验。先观察小鼠正常的呼吸和皮肤黏膜颜色后，按以下方式进行连续两次腹腔注射：其中一只小鼠注射0.3mL 5%亚硝酸钠后立即注射0.2～0.3mL 1% 美兰，另外1只注射0.3ml 5%亚硝酸钠后立即注射0.2～ 0.3mL生理盐水。 立即记录给药时间，观察比较两鼠的表现 ，直到动物死亡为止，记录其存活时间（min)，其余处理方法同乏氧性缺氧。美兰的解救机制：美兰是还原剂，可将高铁血红蛋白还原为亚铁血红蛋白。 取体重一致的另1对小鼠用于氰化钾中毒实验：先观察小鼠正常的呼吸和皮肤黏膜颜色，接着按以下方式进行连续三次或两次腹腔注射，其中一只小鼠注射0.1%氰化钾后立即注射1%亚硝酸钠和10% 硫代硫酸钠，另外1只小鼠注射0.1%氰化钾后立即注射生理盐水。 立即记录给药时间，观察比较两鼠的表现 ，直到动物死亡为止，记录其存活时间（min)，其余处理方法同乏氧性缺氧。 氰化钾中毒的机制为：氰化钾对线粒体内呼吸链的细胞色素氧化酶具有很高的亲和力，氧化型细胞色素氧化酶与氰离子结合后便失去传递电子的能力，以至氧不能被利用、氧化磷酸化受阻。 氰化钾中毒的解救机制：先给予亚硝酸钠，迅速将体内部分血红蛋白氧化形成高铁血红蛋白，后者与游离的氰离子结合或夺取已与细胞色素氧化酶结合的氰离子，形成氰化高铁血红蛋白，使细胞色素氧化酶复活；再给予硫代硫酸钠，形成稳定性强﹑无毒的硫氰酸盐，由尿排出而解毒。 还剩最后1只小鼠，作为正常对照，采用颈椎脱臼方式处死，然后心脏采血，方法同乏氧性缺氧。最后，比较7只小鼠的血液、肝脏以及皮肤黏膜的颜色。 实验对动物的操作基本结束，实验里要注意以下这些问题（1）用于乏氧性缺氧实验的广口瓶一定要密闭，可用凡士林涂在瓶塞外面；（2）实验过程中应将实验室窗户打开，以免室内人员发生一氧化碳中毒。实验完毕，应及时倒掉试管中的甲酸和浓硫酸液并大量水冲洗干净，以免继续产生一氧化碳；（3）小鼠腹腔注射部位应稍靠左下腹，勿损伤肝脏，但也应避免将药液注入肠腔或膀胱。 （4）亚硝酸钠中毒抢救用的1%美蓝溶液，其注射用量宜事先通过预实验确定，抢救时用量过多会降低效果；（5）氰化物有剧毒，勿沾染皮肤、粘膜，特别是有破损处，实验后洗手，并将用过的注射器等物品洗涤干净。提醒大家，小鼠较多，做好记录，勿混淆。 实验结果是实验报告的重点之一，本实验要求以文字描述结合下面的表格列出实验结果，并根据表2结果，进行统计学处理和差异显著性检验。 将不同类型缺氧的实验结果填入表1，包括呼吸变化，皮肤粘膜、血液、肝脏颜色，存活时间，各组平均存活时间。 各实验小组将不同类型缺氧小鼠的存活时间填入表2，并计算平均值。在亚硝酸钠中毒、氰化钾中毒这样设立对照鼠的实验中，也可进行实验和对照两组间的统计性检验。 实验讨论亦是实验报告的重点之一，分析讨论缺氧实验中各种现象发生的机理、以及分析实验成功失败的经验教训。 机能实验学 缺氧的综合实验  不同类型的缺氧对小鼠的影响 内 容 实验目的 1 实验步骤 2 注意事项 3 实验结果 4 讨论 5 实验目的 利用实验动物复制乏氧性、血液性和组织中毒性缺氧模型，并观察不同类型缺氧对动物呼吸的影响、缺氧时血液颜色的变化。通过实验掌握不同类型缺氧模型复制的方法和原理，熟悉有关抢救的机理。 实验步骤 1 取小鼠7只，称重，分别以黄色三硝基苯酚（又称苦味酸）溶液标号，取体重一致的2对小鼠留在后面用于亚硝酸钠中毒、氰化钾中毒的实验，其余3只鼠用于其他实验； 实验步骤 2 （1） （2） 先取1只小鼠，观察其正常的呼吸和皮肤黏膜颜色,即将其放入盛有定量钠石灰的缺氧瓶内； 塞紧瓶塞，记录时间，每隔5分钟重复观察，直到动物死亡，记录其存活时间（min)。 乏氧性缺氧 NaOH ?CaO Wide-mouth bottle 实验步骤 2 （3） 立即打开小鼠胸、腹腔，并用含0.1mL肝素生理盐水的1mL注射器从小鼠心脏抽取0.2～0.3mL血液并混匀，保留此注射器以及小鼠，以用于后面进一步观察比较不同实验小鼠血液、皮肤和肝脏的颜色。 乏氧性缺氧（续） 实验步骤 3 一氧化碳中毒性缺氧 （1）将一只小鼠放入与CO发生装置连接的500mL广口瓶内（见左图，观察其正常表现，再盖好瓶塞。 实验步骤 3 一氧化碳中毒性缺氧（续） （2）在试管中加入甲酸3mL，然后再加上2mL浓硫酸，塞紧瓶塞，此时即有CO产生。 3ml methanoi