中国医科大基础医学遗传学PPT课件 染色体病.ppt

第四章 染色体病 第一节??染色体研究方法 一、染色体制备 ?二、染色体形态学和显带 三、人类细胞遗传学研究进展??????? 第二节? 染色体变异与多态 一、长度变异 二、随体 三、副缢痕 四、Q、G和C带的多态 第三节? 染色体畸变 一、 数目异常及其产生原因 二、?染色体结构异常???? 第四节??染色体异常与疾病?? 一、自发流产 二、出生缺陷 三、常染色体异常综合征 四、性染色体异常综合征 直到20世纪50年代，人类对自身染色体的认识才通过对两个错误概念的纠正得到了发展。这两个错误是： 1）认为人类染色体数目为48条； 2）认为哺乳动物的性别是同果蝇一样由常染色体与性染色体数目之比率决定的。 由于限于当时的实验材料和技术，对上述的问题认识不足。徐道觉的实验中的偶然发现和Tijo及Levan研究证实，人类染色体不是48条而是46条。随之，确定了X、Y染色体决定性别。 Down 综合征、Turner 综合征和Klinefelter 综合征是由于染色体数目异常。随之，发现染色体结构改变引起疾病。人类开始在细胞遗传学水平认识疾病发生的遗传基础 第一节 染色体研究方法 一、常规染色体的制备与分析 1）细胞培养与染色体制备 正常人外周血或细胞 RPMI1640培养基+15%小牛血清=5ml 370C，培养68 hr 加秋水仙素，培养2~4 hr（抑制细胞分裂） 收集细胞 离心，去上清液（1000rpm/10 min） 低渗处理，0.075 M KCI，370C，25min 预固定，甲醇：冰醋酸=3：1 离心，去上清液（1000rpm/10 min） 重复固定三次 制片，染色，观察，染色体分析 二、染色体形态学和显带 在染色体狭窄处是着丝粒(centromere,cen), cen将染色体分为短臂(p)和长臂(q)。 染色体形态： 中央着丝粒染色体, cen 位于染色体的1/2处。 亚中着丝粒染色体, cen 位于染色体的5/8处 近端着丝粒染色体, cen 位于染色体的7/8处 1、核型（Karyotype）分析 将一个体细胞中全套染色体按一定方式排列起来，构成图像。 根据人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN），根据染色体的形态、大小和着丝粒的位置将染色体分为七组： A组：1~3，大 B组：4、5 大 C组：6~12+X 中 D组：13~15 中 E组：16~18 ，小， F组：19、20，小 G组：21、22 +Y，最小 染色体的两端为端粒，是一种蛋白-DNA结构，含有TTAGGG六核苷酸重复延伸序列，保护染色体不被降解，防止染色体末端融合，端粒缩短与细胞的寿命有关。 近端着丝粒染色体（13～15，21、22和Y）除Y以外都具有随体，位于短臂末端介细丝连接的球状小体，细丝部位是rDNAgene所在部位，转录rRNA 进而形成核仁。 核型的描述 染色体总数，性染色体 正常男性 46? ，XY 正常女性 46 ，XX 2、染色体显带技术 染色体显带：经不同的方法处理染色体，经染色后使染色体在纵轴上显示明、暗或着色深、浅相间的横纹即显带（Banding）。 这种带对每一条染色体来说都是独特的，可以区分和确认每一条染色体。 显带方法： G-显带：是最常用的方法。标本经胰蛋白酶处理后，应用Giemsa染色，镜检、分析,显示深染和浅染相间的带纹。 46, XY 46, XX 常规G-banding使每个单倍体（24条染色体）都可以显示350~550条带， 每条带大约代表5x106~10x106bp的DNA。 每个基因长度不等，从102bp（a珠蛋白基因）~2x106bp（抗肌萎缩蛋白基因）。 估计平均每3000bp为一个基因，每条染色体可能代表几个或几百个基因 G显带深染带富含AT，富含长分散DNA序列（long interspersed sequence，LINES）是DNA的重复区域，不编码表达基因. G显带浅带，富含GC，含有许多转录基 因。这种DNA在间期核中呈现较为伸展的状态。