中性粒细胞分离液试剂盒说明书.PDFVIP

中性粒细胞分离液（试剂盒）说明书 产品组成 产品编号 产品名称 包装规格 CLS1085 人或各种动物外周血及脏器组织中性粒细胞分离液 200 ml CLS1085P 人中性粒细胞分离液试剂盒 2 ×100 ml/kit CLS1091 大鼠外周血中性粒细胞分离液试剂盒 2 ×100 ml/kit CLS1091P 大鼠脏器组织中性粒细胞分离液试剂盒 2 ×100 ml/kit CLS1100 小鼠外周血中性粒细胞分离液试剂盒 2 ×100 ml/kit CLS1100P 小鼠脏器组织中性粒细胞分离液试剂盒 2 ×100 ml/kit CLS1100PK 小鼠脾脏中性粒细胞分离液试剂盒 2 ×100 ml/kit 产品性能指标 pH 7.0~7.5 渗透压 280~340 mOsmol/kg 内毒素 ≤0.5 EU/ml 无菌 直接接种培养14 天后培养基澄清 澄明度及不溶性颗粒物 每50 ml 溶液中含10 μm 以上的不溶性微粒20 粒以下，含25 μm 以上的不溶性微粒5 粒以下 贮藏及保存期限 18°C~25°C 避光保存，有效期两年。启封后置4°C 保存，有效期一周。 注：若保证无微生物污染，启封后可置4°C 长期保存。但应注意保存温度较低时本分离液易出现白色结晶，影响分离效 果。 各种动物中性粒细胞分离液使用方法说明及图例 1. 取新鲜抗凝血液与羟乙基淀粉550按1:1比例混合，37°C反应5~10分钟（5 ml 以下样本反应5分钟，5 ml 以上样本反应10 分钟）； 取组织单细胞悬液（细胞浓度为2 ×108 9 ~1 ×10 个/ml ）与羟乙基淀粉550按1:1比例混合，37°C反应5~10分钟（5 ml 以 下样本反应5分钟，5 ml 以上样本反应10分钟）； 2. 加入为步骤1中所得混合液1/2体积的全血及组织稀释液混匀20°C ~30°C 自然沉降20~30分钟，吸取上清备用，留取沉淀 红细胞备用； 3. 向步骤2 中所得上清液中加入为其一倍以上体积的细胞洗涤液混匀，以500 g （约1800转/分）离心15分钟（半径15 cm 水平转子），弃去上清保留沉淀细胞； 4. 向细胞沉淀中加入全血及组织稀释液调整细胞浓度为2 ×108 9 ~1 ×10 个/ml ，小心叠加于细胞分离液之液面上（混合液： 分离液=2:1）； 5. 以400 g （约1500转/分）离心20分钟（半径15 cm水平转子）； 此时，离心管中由上至下分为四层：第一层；为稀释液层。第二层；为环状乳白色单个核细胞层。第三层；为浑浊分离 液层（此层液体中含有大量白细胞）。第四层；为极少数红细胞层（含一定量中性粒细胞）。 6. 向步骤2 中留取的红细胞中按1：1的比例加入全血及组织稀释液混匀并小心叠加于细胞分离液之液面上，以400 g （约 1500 转/分）离心20分钟（半径15 cm水平转子）； 此时，离心管中由上至下分为四层：第一层；为稀释液层。第二层；为环状乳白色白细胞层。第三层；为分离液层（此 层液体中含一定量中性粒细胞）。第四层；为红细胞层（含大量中性粒细胞）。 7. 收集步骤5及步骤6中所得第四层红细胞层，使用红细胞裂解液裂解并去除红细胞获得大量中性粒细胞。 8. 收集步骤5 中所得第三层细胞、步骤6 中所得第三层中性粒细胞及步骤6 中所得大量中性粒细胞放入约为其5~10 倍体 积的细