[高二理化生]生物必修三12.pptVIP

基因文库: 将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库(gene library) PCR技术与细胞DNA复制的比较 转化：重组质粒DNA分子通过与膜蛋白结合进入受体细胞，并在受体细胞内稳定维持和表达的过程称之为转化。 转化现象最早是由Griffith于1928年在肺炎双球菌中发现的。 3.运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否成功，最方便的方法是检测棉花植株是否有（　） A.抗虫基因　　B.抗虫基因产物 C.新的细胞核　D.相应性状 4.转基因动物转基因时的受体细胞是（　） A.受精卵　　　B.精细胞　　　 C.卵细胞　　　D.体细胞 第四步：目的基因的检测和鉴定 分子水平的检测 检测是否插入了目的基因 检测是否转录出了mRNA 检测是否翻译成蛋白质 个体生物学水平的检测 （做抗虫或抗病的接种实验） 多数真核生物基因中编码蛋白质的序列被一些不编码蛋白质的序列隔开，每一个不编码蛋白质的序列称为一个内含子.这类基因经转录、加工形成的mRNA中只含有编码蛋白质的序列。某同学为检测某基因中是否存在内含子，进行了下面的实验： 步骤①：获取该基因的双链DNA片段及其mRNA； 步骤②：加热DNA双链使之成为单链，并与步骤①所获得的mRNA按照碱基配对原则形成双链分子； 步骤③：制片、染色、电镜观察，可观察到图中结果。 请回答：（1）图中凸环形成的原因是 ， 说明该基因有 个内含子。 3、将目的基因导入微生物细胞 常用法：Ca2+处理 常用菌：大肠杆菌 微生物作受体细胞原因： 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少 过程： 大肠杆菌细胞 用Ca2+处理 感受态细胞 重组表达载体DNA溶于缓冲液 混合 感受态细胞吸收表达载体 1、基因工程中科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是 A．结构简单、操作方便 B．繁殖速度快 C．遗传物质含量少、简单 D．性状稳定、变异少 2、基因工程常用的受体细胞有 ①大肠杆菌 ②枯草杆菌 ③支原体 ④动植物细胞 A．①②③④ B．①②③ C．②③④ D．①②④ B D D A 四、目的基因的检测与鉴定 检测 ①导入检测：目的基因是否导入受体细胞 方法—— DNA分子杂交 ②表达检测 转录检测—RNA分子杂交 翻译检测—抗原抗体杂交 分子检测法 鉴定 抗虫鉴定 抗病鉴定 活性鉴定等 个体水平的鉴定 知识延伸——DNA分子杂交技术 该方法是根据碱基互补配对原则，先将两种生物的DNA从细胞中提取出来，再通过加热或提高pH的方法，将双链DNA分离成为单链。然后，将两种生物的DNA单链放在一起杂交，其中一种生物的DNA单链事先用同位素标记。如果两种生物DNA单链之间存在互补的部分，就能形成双链区。由于同位素被检出的灵敏度高，即使两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区，也能够被检出,从而检出所要查明的DNA或基因 知识延伸——抗原抗体杂交 Western杂交──蛋白质分子（抗原—抗体）之间的杂交。它是检测目的基因是否表达出蛋白质的一种方法。　　具体做法是：　　第一步，提取目的基因在大肠杆菌中表达出的蛋白质；　　第二步，将表达出的蛋白质（抗原）注入动物进行免疫，产生相应的抗体，并提取出抗体（一抗）；　　第三步，从转基因生物中提取蛋白质，走凝胶电泳；　　第四步，将凝胶中的蛋白转移到硝酸纤维素膜上；　　第五步，将抗体（一抗）与硝酸纤维素膜上的蛋白杂交，这时抗体（一抗）与目的基因表达的蛋白（抗原）会特异结合。　　 由于这种抗原—抗体的结合显示不出条带，所以还要加入一种称为二抗的抗体，它可以与一抗结合，二抗抗体上带有特殊的标记。如果目的基因表达出了蛋白质，则结果为阳性。 1.目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是 ①检测受体细胞中是否有目的基因 ②检测受体细胞中是否有致病基因 ③检测目的基因是否转录出mRNA ④检测目的基因是否翻译出蛋白质 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ C 2.（多选）人们利用基因工程的方法，用大肠杆菌生产 人类胰岛素，这一过程涉及到 A.用适当的酶对胰岛素基因与运载体进行切割并连接 B.把重组后的DNA分子导入受体细菌内进行扩增 C.检测重组DNA分子是否导入受体细菌内并表达出性状 D.筛选出能产生胰岛素的“工程菌” ABCD 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从