MDA多重置换扩增技术研究进展教学幻灯片讲义.pptxVIP

多重置换扩增（MDA）技术对单细胞基因组测序技术研究进展;基因测序技术;截至2007年，第二代基因测序方法已经普遍推广应用，极大地降低了测序的成本和时间，实现了高通量测序。 2008年又提出了更快更好的第三代测序方法---单分子测序（SMS） ;基因测序技术;单细胞全基因组测序;全基因组扩增技术; 通过MDA扩增DNA;目前单细胞微生物可以通过对多重置换扩增反应（ MDA）得到的扩增DNA进行测序。 在细菌中几个飞克 (10-15g)的DNA能扩增得到微克(10-6g)的高分子量DNA，扩增得到的DNA 适合DNA文库的构建和Sanger测序。MDA生成的DNA也可直接作为模板供焦磷酸测序。 单个细胞间基因序列的联系也是一个功能强大的工具，它可用于对从环境DNA的提取物（宏基因组序列）得到的多重有机体通过鸟枪法测序来指导构建基因芯片。 ;多重置换扩增（MDA）的示意图： ????????首先随机六碱基引物在多个位点与模板DNA退火，接下来Phi 29 DNA 聚合酶在DNA的多个位点同时起始复制，它沿着DNA模板合成DNA,同时取代模板的互补链。被置换的互补链又成为新的模板来进行扩增，因此最终我们可以获得大量高分子量的DNA.;多重置换扩增 (MDA);分离单细胞;细胞分选;流式细胞仪的测量对象;全基因组扩增(WGA)是一组对全部基因组序列进行非选择性扩增的技术，其目