陆地棉花粉管通道法的应用研究.doc

陆地棉花粉管通道法的应用研究 周小云1 李秋英2 马盾1* 王子霞1 海热古力1 （1新疆农业科学院核技术生物技术研究所，新疆农作物生物技术重点实验室，乌鲁木齐 830091 2新疆林业学校，乌鲁木齐 830091） 摘 要：本文根据花粉管通道法转基因技术和夏季在北疆和冬季在海南三亚南繁的多年工作实践，从陆地棉转基因的受体材料的选择、种植与管理、基因导入过程和当代转化种子的种植与管理等影响陆地棉转基因的因素进行总结，旨在提高陆地棉转基因的效率。 关键词：花粉管;陆地棉;遗传转化 中图分类号：S562;Q812 文献标识码： 文章编号： The Application of Pollen Tube Pathway on Upland Cotton ZHOU Xiao-yun1,LI Qiu-yin2, MA Dun1*,WANG Zi-xia1,Haireguli1 (1Institute of Nuclear and Biological Technology,Xinjiang Academy of Agricultural Sciences, Xinjiang Key Laboratory of Farm Corp Biotechnology ,Urumqi 830091,China 2 Xinjiang Forestry School, Urumqi 830011, China) Abstract: In order to increase pollen tube pathway mediated genetic transformation efficiency of the cotton, according to the technical and research in recent years, the paper summarizes the impact of cotton genetic transformation of the external factors. Key：Pollen-tube pathway; Gosspium hirsutum L.;Gentic transformation 应用花粉管通道法转化目的基因，可以直接获得转基因棉花种子，操作简便易掌握，不受棉花基因型控制，受体材料限制少，且具有转化速度快，节省经费等特点。再利用南繁育种条件，夏季当地转化，冬季海南筛选，或冬季海南转化，夏季当地筛选，在一年时间内可获得棉花转基因植株，大大加快了研究进程，提高了选育转基因棉花新品种的效率，缩短转基因棉花育种周期[1]。但是，转基因受体材料的选择、种植与管理、基因导入时间、花蕾的大小、导入时的环境气候条件、操作熟练程度以及转化当代种子种植与管理等因素都会直接影响花粉管通道法转化的效率。 新疆农作物生物技术重点实验室从上世纪90年代开始运用花粉管通道法转基因，已获得了抗虫基因（Bt）、天麻抗真菌蛋白基因（GAFP）、兔防御素基因(NP-1)、雪莲抗寒基因（PEBP）、磷酸蔗糖合成酶基因（SPS）、蔗糖合成酶基因（SUSY）等转基因棉花植株。本文根据花粉管通道法的技术和结合本实验多年工作总结，从陆地棉(Gosspium hirsutum L.) 转基因的受体材料的选择、种植与管理，基因导入过程和当代转化种子的种植与管理等影响 收稿日期： 修回日期： 基金项目：国家自然科学基金项目和新疆维吾尔自治区重大专项子项目（200731132-4） 作者简介:周小云,（1977-）,男, 重庆人,助研,硕士,研究方向为棉花分子育种， Te1：0991-4507186， E-mail：xiaoyunzhou77@. * 为通讯作者，马盾,（1960-）,男,汉族， 新疆人，研究员,硕士，主要从事棉花分子育种， Te1：0991-4507186， E-mail：madun12700@163.com. 花粉管通道法转化外源转基因效率的因素进行了总结，从优化外部条件来提高花粉管通道法转化效率。 1.基本原理与基础理论 上世纪70年代末期我国学者在远缘杂交的基础上，采用授粉时混入异种作物花粉匀浆的方法，发现后代中出现与异种作物相应性状的变异，推测外源DNA可能参与了受精过程[2]。周光宇等结合我国远缘杂交的成功经验，提出了远缘杂交中存在DNA片段杂交的假设，并在这一假设的基础上，设计了自花授粉后导入外源DNA的花粉管通道转基因技术[3].龚蓁蓁等利用同位素示踪法证实了这一机理[4]。邓德旺等采用激光共聚焦显微镜技术等细胞生物学方法评价了花粉管通道转基因技术原理，外源基因导入的途径确立为花粉管外通道而非花粉管内