舌癌患者舌苔变化与舌脱落上皮细胞mRNA表达改变关系的研.PDFVIP

维普资讯 临床 研 究 舌癌患者舌苔变化与舌脱落上皮细胞 c-myc基因 mRNA表达改变关系的研究 杨丹丹 1 詹 臻2 范 媛 3 丁 兴2 张军峰 2 (1．江苏省疾病预防控制中心，江苏南京210009；2．南京 中医药大学，江苏南京 210029； 3．南京医科大学附属 口腔 医院．江苏南京210029) 提 要 目的：研究舌癌患者舌苔变化与舌脱落上皮细胞 c—mvc基因mRNA表达改变的相关性。方法 ：取 5组不 同 舌苔(薄 白苔、白厚苔、黄薄苔、黄厚苔、无苔)表现的舌癌患者和正常人的舌背黏膜 ，采用实时荧光定量PCR(RT—PCR)技 术检测各组c—mvc基 因mRNA表达量。结果：荧光定量PCR检测c—mvc基 因mRNA相对表达量(与 内参基因比)值为：正 常对照组 6、38023~10 ，黄薄苔组 3．88921x10 ，白厚苔组 1,50210~10 ，无苔组 207987x10 ，黄厚苔组6、2895lxl0 ，薄白 苔组 3、00206x10～ C--mycmRNA的表达水平从高到低依次为 ：黄厚苔组黄薄苔组薄白苔组无苔组白厚苔组正常对 照组 结论 ：舌癌患者舌脱落上皮细胞c—mvc基 因mRNA表达量明显高于正常人 ，且黄苔组高于白苔组。通过观察舌癌患 者的舌苔 ．我们可以初步估计 患者的病情严重程度 关键词 舌癌 舌苔 c—mycutRNA表达 中图分类号 R241．25 文献标识码 A 文章编号 1672-397X(2007)07-0023-03 近十多年来 ．国内学者利用 常对照组 病理组患者年龄 30～62 1．3 RNA样 品反转 录与PCR扩 一 些现代科学技术手段开展了舌 岁 ．根据舌苔情况又分为5组 薄 增 提取总 RNA (紫外分光光 诊现代化、客观化的研究．其中包 白苔组 (5例)：男3例 ．女 2例 ：白 度 法确 定 样 品纯度 )后 进 行 括舌苔中舌脱落上皮细胞的形态 厚苔组 (5例)：男3例．女 2例 ；黄 RNA样 品反转 录 反应条件 ： 学 、细胞化学 、微量元素检测 、LI 薄苔组 (4例)：男3例 ．女 1例 ：黄 30℃ ，10min；42oC．30～50min：95oC． 腔环境和机体环境的影响以及舌 厚苔组 (5例)：男 3例 ，女 2例 ：无 5min：4℃，5min。反转录产物稀释 质微循环、血液流变学等方面。但 苔组 (3例)：男 1例，女 2例。正常 10倍 ．进行PCR扩增 ．条件如下 ： 文献检索表明．近几年开展舌苔 对照组 (正常薄白苔 ．共 4例)：男 94℃ ，2min；94oC ，30s；61oC ，30s； 研究的工作不够深入 ．特别是对 2例．女 2例 ：胎龄 7～8个月 病理 72oC，20s；20oC，5min；30cycles。扩 于舌脱落上皮细胞 的形成有着很 组样本均为舌癌切除术患者舌背 增后 的产物将用于定量 PCR反 重要作用的分子机制 、基因调控 、 黏膜相应正常的区域 ：正常对照 应 。 信号转导机制、黏附分子表达等 组标本取 自引产的存活胎儿舌背 1．4 荧光定量PCR反应 使用 的研究 尚未涉及 我们通过采用 黏膜 将黏膜无菌取出后立 即液 TAKARA公司试剂盒检测 ．实验 实时荧光定量PCR技术检测不同 氮保存 。舌苔辨证 ：参考 《中医诊 结果用软件 R0tor-Gene5．0以及 舌苔表现的舌癌患者舌脱落上皮 断学》舌诊标准辨舌苔 Excel7．0进行数据分析处理 将 细 胞 中原 癌 基 因 e—myc基 因 1．2 引物与探针 mye：5-GGA 扩增后 的PCR产物按照 10倍浓 mRNA表达量的变化．旨在从基 GGCTATTCTGCCCATITG：3 一CA 度梯 度进行稀 释 ．选择 1／1000． 因调控水平探讨 c—mvc基 因与肿 TCACCTTI丫rGGTCGTCGGAG。 内 1／10 000，1／100 000，1／1000 000 瘤患者舌苔变化的